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硝呋索爾ELISA試劑盒

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品　　牌：
金萊生物

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出廠價(jià)：
0

主要規(guī)格：
1000000T每盒

用　　途：
體外診斷

一、原理本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)水產(chǎn)和雞肉等組織樣本中的硝呋索爾，在微孔條上預(yù)包被上偶聯(lián)抗原，利用抗原與抗體的特異性免疫化學(xué)反應(yīng)的原理來(lái)進(jìn)行的，樣本中的硝呋索爾和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗硝呋索爾衍生物抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣品中的硝呋索爾含量與樣品的吸光度值呈反比，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出硝呋索爾含量。二、試劑盒技術(shù)指標(biāo)：試劑盒靈敏度： 0.1ppb 樣本檢測(cè)下限：組織、蜂蜜 0.2ppb 魚(yú)/蝦等水產(chǎn)品組織因存在一定的干擾，檢測(cè)下限為0.3ppb 回收率：魚(yú)/蝦水產(chǎn)組織 90%±15% 蜂蜜/雞肉/肝臟樣本 80%±15% 交叉反應(yīng)率：硝呋索爾代謝物 100% 呋喃唑酮代謝物 ﹤0.1% 呋喃妥因代謝物﹤0.1% 呋喃西林代謝物﹤0.1% 三、試劑盒組成 1．微量測(cè)試孔：96T/8孔 2．標(biāo)準(zhǔn)品液： 0ppb 0.1 ppb 0.3ppb 0.9ppb 2.7ppb 8.1ppb （1ml/瓶） 3．酶標(biāo)記物 12ml 4．抗體工作液 7ml 5．底物緩沖液 7 ml 6．底物液 7 ml 7．終止液 7 ml 8．20倍濃縮洗滌液 50 ml 9．復(fù)溶液 50 ml 10．15.1mg衍生化試劑四、所用儀器、試劑具備的儀器：微孔酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）微量移液器：單道20μl-200μl，100μl-1000μl、多道250μl 試劑：甲醇、氫氧化鈉、乙酸乙酯、正己烷、濃HCl、磷酸氫二鉀、鄰硝基苯甲醛、亞硝基鐵氰化鉀（K2Fe（CN）5·NO·3H2O）ZnSO4·7H2O 五、樣本前處理步驟樣本處理前須知處理任何樣本時(shí)，都必須注意：（a）實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。（b）實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈，必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。樣本前處理需配制： 1．衍生化試劑稱(chēng)15.1mg鄰硝基苯甲醛加甲醇10ml溶解(濃度10mM) 2．C液：（供奶樣用）稱(chēng)12.5g亞硝基鐵氰化鉀用去離子水定溶至100ml。 D液：（供奶樣用）稱(chēng)29.8g 硫酸鋅用去離子水溶解定溶至100ml。 3．0.1M K2HPO4 稱(chēng)22.8g K2HPO4·3H2O 加去離子水溶解定溶至1L 4．1M HCl取8.6ml濃HCl加水定溶至100ml。 5．1M NaOH稱(chēng)取4g NaOH加水定溶至100ml。樣本的處理 (a) 肉樣或魚(yú)蝦用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,接（d）的描述方法 (b) 奶樣 1. 取出5ml的奶樣本到玻璃離心管中,分別加入C液和D液各250μl。 2. 用振蕩器充分混合樣本,用恒溫離心機(jī)4000r/min以上離心10min(4-12℃).若沒(méi)有恒溫離心機(jī),則先將樣本降溫至大約8℃,然后離心。 3. 接(d)的描述方法 (c) 蜂蜜 1. 取1±0.05g樣本到離心管中。 2. 加入4ml的去離子水溶解,再加入0.5ml 1M HCl和100μl衍生化試劑,充分振蕩。 3. 接(d)第2步描述方法 (d)接上面的方法 1. 取1±0.05g的均質(zhì)樣本(肉樣/魚(yú)蝦)、牛奶的離心上清液1.1ml（相當(dāng)1ml奶樣），分別加入4ml的去離子水，0.5ml 1M HCl和100μl衍生化試劑，充分振蕩。 2. 置于56℃環(huán)境中孵育（2h）。 3. 分別加入5ml 0.1M K2HPO4， 0.4 ml 1M NaOH和5ml的乙酸乙酯，充分振蕩30s； 4. 在室溫下（20-25℃）4000r/min以上離心10min。 5. 取出2.5ml的乙酸乙酯到另一潔凈容器中于50℃氮?dú)?空氣吹干。 6. 用1ml正己烷溶解干燥物，用1ml已稀釋好的復(fù)溶液充分混合；在室溫下（20-25℃）4000r/min以上離心10min。 7. 取50μl下層相用于分析。樣本稀釋倍數(shù)：2

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