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己烯雌酚ELISA試劑盒

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品　　牌：
金萊生物

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出廠價(jià)：
0

主要規(guī)格：
1000000T每盒

用　　途：
體外診斷

一、原理本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)水產(chǎn)和雞肉等組織樣本中的己烯雌酚，在微孔條上預(yù)包被上偶聯(lián)抗原，利用抗原與抗體的特異性免疫化學(xué)反應(yīng)的原理來(lái)進(jìn)行的，樣本中的己烯雌酚和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗己烯雌酚的抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣品中的己烯雌酚含量與樣品的吸光度值呈反比，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出己烯雌酚含量。二、試劑盒技術(shù)指標(biāo)：試劑盒靈敏度： 0.1ppb 樣本檢測(cè)下限：組織（蝦、魚(yú)） 0.1ppb 豬肉/肝雞肉/肝 2ppb 飼料 20ppb 尿液 0.6ppb 回收率：飼料 90±10% 組織 85±10% 尿液 80±10% 交叉反應(yīng)率：己烯雌酚 100% 雙烯雌酚 35% 己烷雌酚 10% 己炔雌二醇 <0.1% 雌三醇 <0.1% 三、試劑盒組成 1．酶標(biāo)板：96T/8孔 2．標(biāo)準(zhǔn)品液： 0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb（1.0mL/瓶） 3．酶標(biāo)記物 12mL 4．抗體工作液 7mL 5．底物緩沖液 7 mL 6．底物液 7 mL 7．終止液 7 mL 8．20倍濃縮洗滌液 50 mL 用去離子水稀釋到1000 mL 9．20倍濃縮復(fù)溶液 12mL 用去離子水稀釋到240 mL 四、樣本前處理步驟樣本處理前須知： 1．實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。 2．實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈，必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。樣本前處理需配制：配液1：6M H3PO4 100mL 濃H3PO4（含量85%）加去離子水150mL混合均勻配液2：1M NaOH 4g NaOH 加去離子水100mL溶解配液3：2M NaOH 8g NaOH 加去離子水100mL溶解配液4：乙腈-丙酮 80mL 乙腈加入丙酮20mL混合均勻樣本的處理：（a）飼料樣本 1．稱(chēng)取2±0.05g搗粹后的飼料樣本，加入8mL乙腈，振搖10min，15℃，3000g以上，離心10min； 2．取2mL上清液，60℃氮?dú)?空氣吹干； 3．加入0.5mL氯仿，渦動(dòng)20s，加入2mL 1M NaOH，渦動(dòng)30s，3000g以上，離心5min； 4．取1mL上清液，加入100μL 6M H3PO4，渦動(dòng)5s；不同樣本按如下方法稀釋?zhuān)? 配合料：取50μL，加入950μL的復(fù)溶液，渦動(dòng)混勻，取50μL /孔用于檢測(cè)。濃縮料/預(yù)混料：取25μL，加入975μL復(fù)溶液，渦動(dòng)混勻，取50μL /孔用于檢測(cè)。取50μL用于分析。配合料稀釋倍數(shù)：100 濃縮料、預(yù)混料稀釋倍數(shù)：200 （b）組織（雞肉/肝、豬肉/肝、蝦、魚(yú)） 1．稱(chēng)取2±0.05g勻漿后的樣本，加入6mL乙腈-丙酮，振搖10min，15℃，3000g以上，離心10min。 2．取3mL上清液，60℃氮?dú)?空氣吹干。加入0.5mL氯仿，渦動(dòng)20s，加入2mL 2M NaOH，渦動(dòng)30s，3000g以上，離心5min。 3．取1mL上清液，加入200μL 6M H3PO4，渦動(dòng)5s。 4．加入3mL乙腈萃取，振蕩10min，室溫3000g以上，離心10min，取上層有機(jī)相， 60℃氮?dú)?空氣吹干。用1mL復(fù)溶液溶解干燥的殘留物。不同樣本按如下方法稀釋?zhuān)? 蝦魚(yú)：直接取50μL水相用于檢測(cè)。稀釋倍數(shù)：2 豬肉/肝、雞肉/肝：取50μL水相加入450μL稀釋后的復(fù)溶液，渦動(dòng)均勻；取50μL用于檢測(cè)。稀釋倍數(shù)：20 （c）尿液 1．取2mL尿液到離心管中，室溫3000g以上，離心10min，直至清亮； 2．移取1mL清亮尿液至離心管中，加入1mL　1M NaOH強(qiáng)烈振蕩5min； 3．加入100μL 6M H3PO4，渦動(dòng)30 s； 4．再加入8mL氯仿進(jìn)行萃取，振蕩10min。15℃，3000g以上，離心10min； 5．去掉上層的水相，取下層有機(jī)相4 mL，60℃氮?dú)?空氣吹干； 6．用3mL稀釋后的復(fù)溶液干燥的殘留物；取50μL 用于分析。樣本稀釋倍數(shù)：6

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