方案優勢

方法檢出限為0.005～0.051mg/kg，回收率為89.1%～105.1%，相對標準偏差為0.8%～4.1%，可以滿足飲料中鄰苯二甲酸酯的檢測要求。

采用標準

相關標準

方法/原理/步驟

　　材料與方法

　　1.材料與試劑

　　飲料市售。

　　標準物質：苯二甲酸二異丁酯(DIBP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、鄰苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、鄰苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、鄰苯二甲酸二戊酯(DPP-1)、鄰苯二甲酸二己酯(D H X P)、鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、鄰苯二甲酸二環己酯(DCHP)、鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二苯酯(DPP-2)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、鄰苯二甲酸二壬酯(DNP)，16種標準品均為Dr.Ehrenstorfer品牌，純度均大于99.5%。甲醇(HPLC級)、乙酸銨(GR)。

　　2.樣品處理

　　準確稱取樣品5g(精確至0.01g)于25mL容量瓶中，加入約10mL甲醇，超聲波振蕩30min，平衡至室溫后用甲醇定容。用離心管離心后，取上清液待測。注意，本實驗所接觸的所有實驗器具均要求為玻璃材質，并要求做全程溶劑空白實驗。

　　3.標準曲線繪制

　　準確稱取1.1節中所述16種標準品各10mg(精確至0.01mg)，用甲醇配成1000mg/L的標準儲備液，于4℃條件下密封保存。

　　將標準儲備液用甲醇稀釋成0.05、0.50、1.00、2.00、5.00mg/L的標準使用液，通過液相色譜-質譜聯用儀測定，以多反應監測(multiple reaction monitoring，MRM)子離子峰面積對質量濃度做標準定量曲線。

　　4.定性和定量

　　樣液經液相色譜-質譜聯用儀測定，通過保留時間及多反應監測MRM子離子相對豐度定性，標準曲線外標法定量。

　　結果與分析

　　1.色譜和質譜條件的優化

　　1)色譜條件優化

　　經實驗可知，使用0.1%甲酸的甲醇溶液＋0.1%甲酸溶液體系，采用梯度洗脫的方式可以將16種鄰苯二甲酸酯較好的分離(梯度見表1)。

　　2)質譜條件優化

　　將16種PAEs標準使用液進行質譜全掃描，找到母離子，然后優化傳輸電壓和碰撞能量，最后分6個時間段進行多反應監測，質譜優化條件參數見表2。本方法采用的分6個時間段進行MRM多反應監測，能最大程度的提高儀器靈敏度和準確度，從而實現16種PAEs的同時測定，優于其他文獻報道。

　　2.標準曲線、線性范圍和檢出限

　　按1.3.4節的方法制作標準曲線，得到線性方程和相關系數，結果表明在相應的線性范圍內，線性關系良好(表3)。取經預先測定不含PAEs的飲料，添加低濃度PAEs后，以3倍信噪比計算檢出限，10倍信噪比計算定量限，結果見表3。

　　3.回收率與精密度

　　為了驗證方法的準確度和精密度，對飲料樣品進行了高、中、低3個不同水平的標準添加回收實驗，每一水平分別做6份平行實驗，計算平均回收率和相對標準偏差(relative standard deviation，RSD)，以回收率表示準確度，相對標準偏差表示精密度。結果表明(表4)，回收率為89.1%～105.1%，相對標準偏差為0.8%～4.1%，方法回收率和精密度良好，能滿足檢測的要求。經實驗比對，本方法回收率、重復性等實驗結果均優于同等條件的國標氣質聯用法。

　　4.樣品測定

　　隨機購買10批次的國產飲料，采用本實驗建立的方法進行檢測。經檢測，除有3批次飲料檢出0.33～0.89mg/kg的DEHP之外(低于GB 9685—2008《食品容器、包裝材料用添加劑使用衛生標準》最大遷移量要求，可能與包裝遷移有關)，其他均低于方法檢出限，經與GB/T 21911—2008《食品中鄰苯二甲酸酯的測定》檢測結果對比，檢測結果一致。

　　每次進樣完后，需長時間自動清洗進樣針以降低殘留。實驗發現，采用50%的甲醇溶液自動清洗進樣針5 s以上便能滿足要求。

儀器設備

　　儀器與設備

　　1290-6410B液相色譜-質譜聯用美國Agilent公司；Direct-Q純水儀美國密理博公司。

　　色譜條件

　　色譜柱：Aglilent Eclipse plus C18(2.1mm×150mm，3.5μm)；流動相：0.1%甲酸的甲醇溶液＋0.1%甲酸溶液；柱溫：3 0℃；進樣量：5μL。

　　質譜條件

　　操作模式：ESI正離子模式；干燥氣流量：10L/min；干燥氣溫度：350℃；毛細管電壓：4000V；噴霧壓力：30psi。