方案優勢

別利用近紅外光譜法、高 效液相色譜法以及聚合酶鏈式反應等結合化學測定方法或質譜法可以定性定量檢測牛乳中的大豆蛋白，但是檢測成本較高。本實驗使用氨基酸分析儀，利用牛乳和大豆蛋白質的氨基酸組成含量差異對牛乳中摻入的大豆蛋白進行定性定量檢測，彌補了現有方法耗時長檢測不靈敏的不足。

采用標準

相關標準

方法/原理/步驟

　　牛乳樣品前處理

　　5種鮮牛乳在4℃條件下，5 000 r／min離一1：,30 min，去除上層脂肪得到脫脂牛乳，編號為鮮牛乳1～5。

　　蛋白質含量的測定

　　凱氏定氮法分別測脫脂后的5種鮮牛乳和3種大豆分離蛋白的蛋白質含量。

　　模擬摻假實驗

　　取牛乳1分別添加10%, 5%, 2%, 1%, 0%的大豆分離蛋白S1(每個摻假樣品的蛋白質含量保持一致)，將以上樣品經均質儀反復均質3次，再經渦輪攪拌過夜備用。摻假牛乳2-5處理方法同摻假牛乳。

　　樣品處理

　　取2.5 mL液體樣品(0.100 g固體樣品)于水解管中加10 mL 6 mol/L鹽酸滴入正辛醇充氮后封管置于110℃烘箱中保持24 h，冷卻后經濾紙過濾到50 mL容量瓶中用超純水反復沖洗水解管及濾紙最后定容。取1 mL的樣液于蒸發皿中在蒸氣浴上蒸干，然后加0.02 mol幾鹽酸2.5 mL溶解用針管過濾器過濾，備用上機。

　　色譜條件

　　熒光激發波長338 nm;熒光發射波長425 nm;柱溫62 0C;反應器35 0C;進樣量10匹;流速0.4 mL/min;柱后泵流速0.4 mL/min;流動相配制見表1，梯度洗脫程序見表2。

儀器設備

　　L-8800型氨基酸分析儀及數據處理平臺；

　　KQ-250B型超聲波清洗器；

　　凱氏定氮裝置、高速冷凍離心機；

　　均質儀。