方案優勢

相比于其他方法，本方法簡單快速，分離效果好，且無需對脂肪酸樣品進行衍生化，為UPC2 技術在油脂相關分析領域的進一步應用和研究提供了參考。

采用標準

植物油脂中的棕櫚酸(C16∶0) 、硬脂酸(C18∶0) 、油酸 (C18∶1) 、亞油酸(C18∶2) 和亞麻酸(C18∶3)5種脂肪酸的含量變化會直接影響到油脂的性質和質量，所以建立一種快速、準確地檢測上述5種脂肪酸含量的方法很有必要。

方法/原理/步驟

　　1.混合標準溶液的配制

　　準確稱取棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸和亞麻酸等5種脂肪酸標準品，分別用正己烷配制質量濃度均為1g/L的各脂肪酸標準品儲備液。其他濃度的工作溶液以此儲備液用正己烷稀釋而成。

　　2.樣品制備

　　稱取約2g大豆油置于50mL燒瓶中，加入4g20%的KOH溶液，加冷凝管于100℃油浴中回流反應8 h，停止加熱。待反應液冷卻后，加入4mL 2mol/L的H₂SO₄溶液進行酸化，卸下燒瓶，轉入分液漏斗，靜置分層，上層用水洗滌至中性，加入無水Na₂SO₄進行干燥，即得脂肪酸樣品。稱取約0.01g該脂肪酸樣品于100mL容量瓶中，用正己烷定容，溶液經有機膜過濾后直接進UPC2系統分析。

　　3.UPC2色譜條件:

??? 采用ACQUITY UPC2 BEH2-EP色譜；系統背壓為2000 psi；色譜柱溫度為50℃；樣品室溫度為10℃;；流動相分別為超臨界CO₂(流動相A)和甲醇-乙腈(體積比1∶1，流動相B)；進樣量為1μL；柱流速為1.0 mL /min;流動相梯度洗脫程序∶0～2min，98%～96%A；2～3min，96%A；3～4min，96%～90%A；4～5min，90%～98%A。

　　4.MS條件：

　　離子源為ESI-；毛細管電壓為2.0 kV；錐孔電壓為40V；源溫度為150℃；脫溶劑氣溫度為500℃；脫溶劑氣體流速為850L/h；錐孔氣體流速為40L/h；SIR離子為m/z 255.42，283. 48，281. 46，279. 45，277. 43。

儀器設備

ACQUITY UPC² 系統

科研人員們可以用它來分離、分析和弄清那些LC和GC技術無法處理的物質，包括:疏水性和手性化合物；脂質；熱不穩定樣品；聚合物

由于其具有溶劑載量少、分離度高、峰形窄、分離速度快等特點，因此也可以作為MS的完美結合。

系統特征:

1.主要的流動相為壓縮二氧化碳（CO₂），與液體流動相或載氣相比，降低了成本和毒性。

2.0.5μL至10μL的靈活可變進樣體積，以及色譜柱與進樣量相匹配的功能，可以最大程度減少樣品損失，以及更換進樣環的需要。

3.色譜柱快速再平衡和更短的運行時間，使您每天可以處理更多的樣品。

4.共同溶劑和色譜柱轉換功能，可以快速地篩選溶劑和色譜柱，提高了方法開發的靈活性。

Waters 2695-SQD

技術指標與參數：

四元梯度輸液泵，溶劑數：四元，光電二極管陣列檢測器 波長：190-800nm

功能與使用范圍：

藥品安全型評價研究、藥代、毒代動力學研究。