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深入研究生物分子相互作用

http://m.9999966666.com 檢測通 時間:2014-12-09

【摘要】

MicroCal VP-ITC 是一種強大而靈敏的、易于使用的等溫滴定量熱儀,能用于研究任何生物分子相互作用。 其快速、方便、無標記和溶液內技術可提供表征蛋白質、抗體、核酸和其他生物分子的分子相互作用所需的信息。 系統廣泛用于研究環境以進行先導化合物優化、靶標發現苗頭化合物驗證、結合驅動機制評估和酶動力學研究以及抑制劑設計。

方案優勢

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采用標準

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方法/原理/步驟

  MicroCal VP-ITC利用等溫滴定量熱法來測量各種分子相互作用中所涉及到的結合親和力和熱力學參數。

  等溫滴定量熱法(ITC)的原理

  等溫滴定量熱儀測量兩個分子相互作用時發生的熱量變化。當相互作用的分子由自由狀態轉入束縛狀態時,非共價鍵重新分配和形成,從而導致吸熱或放熱。ITC通過測量結合配偶體混合時作用于池加熱器、以保持參比池和樣品池零溫差所需的差分電功率來監測這些熱量變化。

  Prod-autoITC200-1

  ITC系統重要部件示意圖

  參比池通常注入水。樣品池包括一個結合配偶體和一個盛裝配體的攪拌注射器。配體以小等分試樣注入樣品池中,直到配體濃度比樣品濃度高出2至3倍為止。每次注入配體都會形成一個熱脈沖,該脈沖與時間積分,并進行濃度歸一化,以生成kcal/mol對摩爾比(配體/樣品)的滴定曲線。得到的等溫線配以結合模型可生成親和力(KD)、化學計量(n)和相系作用的焓(ΔH)。

儀器設備

  MicroCal VP-ITC可提供親和力數據,從而深入了解生物分子相互作用,并可用于研究任何此類的相互作用。等溫滴定量熱法無需使用標記,并且采用溶液內分析,快速方便,可選擇多種緩沖液,沒有分子量方面的限制。

  MicroCal VP-ITC是一套完整的系統,無需額外的附件、試劑或耗材。樣品一旦加載,系統便開始無人值守運行,讓用戶有時間做其它工作。

  等溫滴定量熱法(ITC)測量任何兩個分子間的結合親和力和熱力學參數。物質結合時,或者放熱,或者吸熱。在ITC實驗中測量該熱量變化可精確地測定結合常數(KD)、相互作用化學計量(n)、焓(ΔH)和熵(ΔS),從而在一次實驗中提供齊全的分子相互作用熱力學信息。

  MicroCal VP-ITC也可通過在各種溫度下進行實驗來測定結合后的熱容變化。

  直接測量毫摩到納摩級親和力(KD­S)(10~­2至10-9 M)。

  利用極具競爭力的結合技術測量納摩到皮摩級分解常數(109至1012M)。

  非反應性鎳基合金具有耐化學性,適應各種生物樣品。

  池固定在原位,僅需少量維護,具有可再生和超靈敏的性能。

  精確液體傳遞系統保證進樣準確、可重現。

  硬幣形池優化了樣品混合。

  三個用戶可選的響應時間使應用多樣化。

  用戶可選擇混合速度以配合樣品條件。

  帕帖爾控制實現快速溫度平衡。

  包括ThermoVac™樣品制備和清洗裝置。

  由VPViewer™軟件控制,由Origin™執行數據分析。

  真正的溶液內技術:無需標簽或固定化。無緩沖液限制。輕松處理渾濁溶液。

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