方案優(yōu)勢

0000

采用標準

0000

方法/原理/步驟

　　icroCal Auto-iTC200采用等溫滴定量熱法測量各種分子相互作用中所涉及的結(jié)合親和力和熱力學參數(shù)。

　　等溫滴定量熱法(ITC)的原理

　　等溫滴定量熱儀測量兩個分子相互作用時產(chǎn)生的熱量變化。當相互作用的分子由自由狀態(tài)轉(zhuǎn)入束縛狀態(tài)時，非共價鍵重新分配和形成，從而導致吸熱或放熱。ITC通過測量結(jié)合配偶體混合時作用于池加熱器以保持參比池和樣品池零溫差所需的差分電功率來監(jiān)測這些熱量變化。

　　Prod-autoITC200-1

　　ITC系統(tǒng)主要部件示意圖。

　　參比池通常注入水。樣品池包括一個結(jié)合配偶體和一個盛裝配體的攪拌注射器。配體以小等分試樣注入樣品池中，直到配體濃度比樣品濃度高出2至3倍為止。每次注入配體都會形成一個熱脈沖,該脈沖與時間積分，并進行濃度歸一化，以生成kcal/mol對摩爾比(配體/樣品)的滴定曲線。得出的等溫線配合結(jié)合模型，以生成親和力(KD)、化學計量(n)和相互作用的焓(ΔH)。

儀器設(shè)備

　　MicroCal iTC200設(shè)計特點是易于使用和極其靈敏。其親和范圍大，讓親和力從弱到強的親和體分析極具重現(xiàn)性。自動清洗和注射器加載功能最大限度減少了操作人員的參與，同時用戶友好的軟件會引導所有操作實現(xiàn)快速、準確的分析。

　　系統(tǒng)直接測量生物化學結(jié)合過程中釋放或吸收的熱量，然后計算出結(jié)合親和力(KD)、化學計量(n)、焓(ΔH)和熵(ΔS)。樣品制備和系統(tǒng)優(yōu)化工作量最少，數(shù)據(jù)生成快速、方便。

　　通過MicroCal iTC200可以研究大量的應用，包括表征小分子、蛋白質(zhì)、抗體、核酸、脂類和其他生物分子的分子間相互作用。它也可用于測量酶動力學。

　　所有結(jié)合參數(shù)(親和力、化學計量、焓和熵)只需一次實驗。

　　無需分析開發(fā)過程即可快速獲得初步結(jié)果，無標簽、無固定化且無分子量限制。

　　僅用10µg蛋白質(zhì)就可靈敏地研究任何生物分子的相互作用。

　　直接測量毫摩到納摩級親和力(KD­S)(10~­2至10-9 M)。

　　利用極具競爭力的結(jié)合技術(shù)測量納摩到皮摩級分解常數(shù)(10-9至10-12M)。

　　實驗設(shè)計向?qū)Ш妥詣訑?shù)據(jù)分析功能支持快速可靠的分析。

　　硬幣形池優(yōu)化了樣品混合。

　　池容量小—樣品消耗更少。

　　非反應性鎳基合金具有耐化學性，與各種生物樣品相容。

　　半自動裝填、進樣和池清洗。

　　與非水溶劑相容。

　　用戶友好的軟件實現(xiàn)快速準確的分析。

　　可升級至全自動的MicroCal Auto-iTC200。