方案優(yōu)勢

DSC是一種用于表征蛋白質(zhì)和其他生物分子穩(wěn)定性的強大分析工具， 測量溶液中熱誘導(dǎo)結(jié)構(gòu)躍遷的焓（ΔH）和溫度（Tm）。 該信息讓我們能夠深入了解使蛋白質(zhì)、核酸、膠束復(fù)合體和其他大分子系統(tǒng)穩(wěn)定或失去穩(wěn)定性的影響因素。 數(shù)據(jù)用來預(yù)測貨架期、制定純化策略、表征和評價蛋白質(zhì)構(gòu)建體或其他生物治療性實體，并用來在小分子藥物發(fā)現(xiàn)項目中對配體到蛋白質(zhì)靶的親和力進行排名。 高通量、高靈敏度的MicroCal VP-Capillary DSC系統(tǒng)的特點是：其軟件可通過簡化的實驗設(shè)置和靈活的儀器調(diào)度來簡化工作流程。 自動化的數(shù)據(jù)分析和改進的數(shù)據(jù)分類功能有助于舒緩分析瓶頸，將典型實驗的數(shù)據(jù)分析時間由數(shù)日減少為幾個小時。

采用標準

測量類型:溫度中點Tm測量類型:焓?H測量類型:熱容變化?CpSample capacity:576（六個96-孔板）樣品量:370μL樣品池容積:130μL樣品展示選件:96-孔板Sample capacity:50個樣品 / 24小時（自動系統(tǒng)）Cell material:鉭樣品池:毛細管Noise:0.05 μCal/°CTypical sample concentration:0.1 - 2.0mg/ml溫度范圍:-10°C ~130°CMaximum scan rate:240oC/hResponse time:5s（高反饋）Multiple feedback modes:是（被動, 高增益，低增益）Automated upgrade available:是Baseline repeatability:1.5μCal/°CCell to cell heat compensation:功率反饋Self contained pressuring system:0 ~45 psi重量:25kg電源功率:100-240V, 50/60Hz, 70W尺寸 （寬, 長, 高）：:1010mm x 680mm x 700mm 運行環(huán)境 Operating temperature (°C):10°C ~28°C濕度：:0% ~70% 相對濕度，無冷凝

方法/原理/步驟

　　馬爾文MicroCal VP-Capillary DSC系統(tǒng)專門用于通過差示掃描量熱法(DSC)篩選多種樣品的熱躍遷中點(Tm)和其它熱力學參數(shù)。整個過程利用自動進樣器、控制軟件和分析軟件實現(xiàn)自動化。

　　溶液中的生物分子在其自然(折疊)構(gòu)象和變性(去折疊)構(gòu)象之間保持平衡。測得的熱躍遷中點(Tm)可提供快速、簡易的穩(wěn)定性指示。Tm值越大，生物分子越穩(wěn)定。

　　測量原理

　　由蛋白質(zhì)和其他大分子形成的清晰結(jié)構(gòu)經(jīng)歷溫度誘導(dǎo)的構(gòu)象變化，如去折疊。這些變化造成非共價鍵重新分配,從而導(dǎo)致熱吸收。差示掃描量熱儀測量這種熱量的吸收。

　　Prod-VP-DSC_1

　　MicroCal VP-Capillary DSC的熱核心包括參比池和樣品池，均封裝在一個絕緣夾套中。該裝置設(shè)計成始終保持兩池處于相同溫度。測量過程中，參比池和樣品池同時以恒定的掃描速率加熱。樣品分子去折疊時，吸收熱量，在樣品池和參比池間形成溫差(ΔT)。這就形成了整個帕帖爾單元內(nèi)的熱梯度，建立起成比例的電壓，然后轉(zhuǎn)化成動力形成一個到加熱器的反饋回路，將DT(溫差)恢復(fù)至0。

　　例如，由于蛋白質(zhì)去折疊是一個吸熱事件，在信號中觀察是一個正位移(熱容)。該“溶解”躍遷的中點為Tm，曲線下的面積就是該過程的焓(ΔH)。

　　有關(guān)數(shù)據(jù)分析和測得/導(dǎo)出參數(shù)的詳細描述，請參見技術(shù)頁面。

儀器設(shè)備

　　獲業(yè)界認同的穩(wěn)定性指示技術(shù)需要最少的分析開發(fā)過程，快速確定最佳穩(wěn)定性條件。

　　無標簽研究處于自然狀態(tài)的分子，實現(xiàn)溶液中生物分子穩(wěn)定性的直接測量。

　　通過恒溫控制,可儲存6個標準的96-孔板，確保了大容量和上樣方便性。

　　完全一體化的自動進樣器支持每天處理多達50個樣品。

　　自動裝填、進樣和池清洗功能支持一周七天、一天24小時無人值守運行。

　　強大的軟件讓典型實驗的數(shù)據(jù)分析時間由數(shù)日減少為幾個小時。

　　130µL的有效池容量以及僅0.2 mg/mL的典型濃度要求，允許對稀缺或珍貴的樣品進行熱力學測量。

　　可用于與光學方法發(fā)生干擾的溶液，包括渾濁、有色或顆粒狀樣品。

　　非反應(yīng)性鉭61池具有出色的耐化學性，可確保與蛋白質(zhì)和其他生物分子配合時的惰性。

　　固定在原位的池僅需低程度維護，具有可再生的超靈敏度性能。

　　配套的毛細管池可提供快速掃描和快速溫度平衡。

　　通過智能用戶界面控制，VPViewer™利用支持MicroCal的Origin®軟件自動進行數(shù)據(jù)分析。

　　全套系統(tǒng)包括ThermoVac樣品制備和清洗裝置，無需其它附件、試劑或耗材。

　　Tm飄移配體結(jié)合篩選。

　　MicroCal VP-Capillary DSC系統(tǒng)也可不配自動進樣器。