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馬爾文升入研究分子中的相互作用

http://m.9999966666.com 檢測通 時間:2014-11-27

【摘要】

MicroCal VP-ITC 是一種強大而靈敏的、易于使用的等溫滴定量熱儀,能用于研究任何生物分子相互作用。 其快速、方便、無標記和溶液內(nèi)技術(shù)可提供表征蛋白質(zhì)、抗體、核酸和其他生物分子的分子相互作用所需的信息。 系統(tǒng)廣泛用于研究環(huán)境以進行先導化合物優(yōu)化、靶標發(fā)現(xiàn)苗頭化合物驗證、結(jié)合驅(qū)動機制評估和酶動力學研究以及抑制劑設(shè)計。

方案優(yōu)勢

icroCal VP-ITC可提供親和力數(shù)據(jù),從而深入了解生物分子相互作用,并可用于研究任何此類的相互作用。 等溫滴定量熱法無需使用標記,并且采用溶液內(nèi)分析,快速方便,可選擇多種緩沖液,沒有分子量方面的限制。 MicroCal VP-ITC 是一套完整的系統(tǒng),無需額外的附件、試劑或耗材。 樣品一旦加載,系統(tǒng)便開始無人值守運行,讓用戶有時間做其它工作。

采用標準

測量類型:親和力(KD)測量類型:焓?H測量類型:熵 ?S測量類型:化學計量(n)樣品量:2mL樣品池容積:1400μLInjection syringe volume:300μLSample capacity:4-8 / 8h 天Cell material:鎳基合金樣品池:硬幣形Noise:0.2 ncal/s溫度范圍:2℃ ~80℃Response time:20s(高反饋)Multiple feedback modes:是(被動, 高增益,低增益)電源功率:100-240V,50/60Hz,120W重量: 11.5 kg(量熱計) 9 kg(控制器) 尺寸 (寬, 長, 高):: 200mm x 370mm x 440mm(量熱計) 150mm x 410mm x 360mm(控制器) 運行環(huán)境 Temperature (operating):10℃ ~28℃濕度::0% ~70% 相對濕度,無冷凝

方法/原理/步驟

  MicroCal VP-ITC利用等溫滴定量熱法來測量各種分子相互作用中所涉及到的結(jié)合親和力和熱力學參數(shù)。

  等溫滴定量熱法(ITC)的原理

  等溫滴定量熱儀測量兩個分子相互作用時發(fā)生的熱量變化。當相互作用的分子由自由狀態(tài)轉(zhuǎn)入束縛狀態(tài)時,非共價鍵重新分配和形成,從而導致吸熱或放熱。ITC通過測量結(jié)合配偶體混合時作用于池加熱器、以保持參比池和樣品池零溫差所需的差分電功率來監(jiān)測這些熱量變化。

  Prod-autoITC200-1

  ITC系統(tǒng)重要部件示意圖

  參比池通常注入水。樣品池包括一個結(jié)合配偶體和一個盛裝配體的攪拌注射器。配體以小等分試樣注入樣品池中,直到配體濃度比樣品濃度高出2至3倍為止。每次注入配體都會形成一個熱脈沖,該脈沖與時間積分,并進行濃度歸一化,以生成kcal/mol對摩爾比(配體/樣品)的滴定曲線。得到的等溫線配以結(jié)合模型可生成親和力(KD)、化學計量(n)和相系作用的焓(ΔH)。

儀器設(shè)備

  等溫滴定量熱法(ITC)測量任何兩個分子間的結(jié)合親和力和熱力學參數(shù)。物質(zhì)結(jié)合時,或者放熱,或者吸熱。在ITC實驗中測量該熱量變化可精確地測定結(jié)合常數(shù)(KD)、相互作用化學計量(n)、焓(ΔH)和熵(ΔS),從而在一次實驗中提供齊全的分子相互作用熱力學信息。

  MicroCal VP-ITC也可通過在各種溫度下進行實驗來測定結(jié)合后的熱容變化。

  直接測量毫摩到納摩級親和力(KD­S)(10~­2至10-9 M)。

  利用極具競爭力的結(jié)合技術(shù)測量納摩到皮摩級分解常數(shù)(109至1012M)。

  非反應性鎳基合金具有耐化學性,適應各種生物樣品。

  池固定在原位,僅需少量維護,具有可再生和超靈敏的性能。

  精確液體傳遞系統(tǒng)保證進樣準確、可重現(xiàn)。

  硬幣形池優(yōu)化了樣品混合。

  三個用戶可選的響應時間使應用多樣化。

  用戶可選擇混合速度以配合樣品條件。

  帕帖爾控制實現(xiàn)快速溫度平衡。

  包括ThermoVac™樣品制備和清洗裝置。

  由VPViewer™軟件控制,由Origin™執(zhí)行數(shù)據(jù)分析。

  真正的溶液內(nèi)技術(shù):無需標簽或固定化。無緩沖液限制。輕松處理渾濁溶液。

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