方案優(yōu)勢(shì)

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采用標(biāo)準(zhǔn)

測(cè)量類型:親和力（KD）測(cè)量類型:焓?H測(cè)量類型:熵 ?S測(cè)量類型:化學(xué)計(jì)量（n）樣品量:280μL樣品池容積:200μLInjection syringe volume:40μLInjection volume precision:<1% @ 2μLEquilibration time:< 6min（從25°C 至 5°C）Sample capacity:8-12 / 8h 天Cell material:鎳基合金樣品池:硬幣形Noise:0.2 ncal/s溫度范圍:2℃ ~80℃溫度穩(wěn)定性:± 0.00015°C（25°時(shí)）Response time:10s（高反饋）Multiple feedback modes:是（被動(dòng), 高增益，低增益）Automated upgrade available:是電源功率:100-240V，50/60Hz，70W重量:9.4kg尺寸 （寬, 長(zhǎng), 高）：:210mm x 350mm x 340mm 運(yùn)行環(huán)境 Temperature (operating):10℃ ~28℃濕度：:0% ~70% 相對(duì)濕度，無(wú)冷凝

方法/原理/步驟

　　MicroCal Auto-iTC200采用等溫滴定量熱法測(cè)量各種分子相互作用中所涉及的結(jié)合親和力和熱力學(xué)參數(shù)。

　　等溫滴定量熱法(ITC)的原理

　　等溫滴定量熱儀測(cè)量?jī)蓚€(gè)分子相互作用時(shí)產(chǎn)生的熱量變化。當(dāng)相互作用的分子由自由狀態(tài)轉(zhuǎn)入束縛狀態(tài)時(shí)，非共價(jià)鍵重新分配和形成，從而導(dǎo)致吸熱或放熱。ITC通過(guò)測(cè)量結(jié)合配偶體混合時(shí)作用于池加熱器以保持參比池和樣品池零溫差所需的差分電功率來(lái)監(jiān)測(cè)這些熱量變化。

　　Prod-autoITC200-1

　　ITC系統(tǒng)主要部件示意圖。

　　參比池通常注入水。樣品池包括一個(gè)結(jié)合配偶體和一個(gè)盛裝配體的攪拌注射器。配體以小等分試樣注入樣品池中，直到配體濃度比樣品濃度高出2至3倍為止。每次注入配體都會(huì)形成一個(gè)熱脈沖,該脈沖與時(shí)間積分，并進(jìn)行濃度歸一化，以生成kcal/mol對(duì)摩爾比(配體/樣品)的滴定曲線。得出的等溫線配合結(jié)合模型，以生成親和力(KD)、化學(xué)計(jì)量(n)和相互作用的焓(ΔH)。

儀器設(shè)備

　　MicroCal iTC200設(shè)計(jì)特點(diǎn)是易于使用和極其靈敏。其親和范圍大，讓親和力從弱到強(qiáng)的親和體分析極具重現(xiàn)性。自動(dòng)清洗和注射器加載功能最大限度減少了操作人員的參與，同時(shí)用戶友好的軟件會(huì)引導(dǎo)所有操作實(shí)現(xiàn)快速、準(zhǔn)確的分析。

　　系統(tǒng)直接測(cè)量生物化學(xué)結(jié)合過(guò)程中釋放或吸收的熱量，然后計(jì)算出結(jié)合親和力(KD)、化學(xué)計(jì)量(n)、焓(ΔH)和熵(ΔS)。樣品制備和系統(tǒng)優(yōu)化工作量最少，數(shù)據(jù)生成快速、方便。

　　通過(guò)MicroCal iTC200可以研究大量的應(yīng)用，包括表征小分子、蛋白質(zhì)、抗體、核酸、脂類和其他生物分子的分子間相互作用。它也可用于測(cè)量酶動(dòng)力學(xué)。

　　所有結(jié)合參數(shù)(親和力、化學(xué)計(jì)量、焓和熵)只需一次實(shí)驗(yàn)。

　　無(wú)需分析開發(fā)過(guò)程即可快速獲得初步結(jié)果，無(wú)標(biāo)簽、無(wú)固定化且無(wú)分子量限制。

　　僅用10µg蛋白質(zhì)就可靈敏地研究任何生物分子的相互作用。

　　直接測(cè)量毫摩到納摩級(jí)親和力(KD­S)(10~­2至10-9 M)。

　　利用極具競(jìng)爭(zhēng)力的結(jié)合技術(shù)測(cè)量納摩到皮摩級(jí)分解常數(shù)(10-9至10-12M)。

　　實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)向?qū)Ш妥詣?dòng)數(shù)據(jù)分析功能支持快速可靠的分析。

　　硬幣形池優(yōu)化了樣品混合。

　　池容量小—樣品消耗更少。

　　非反應(yīng)性鎳基合金具有耐化學(xué)性，與各種生物樣品相容。

　　半自動(dòng)裝填、進(jìn)樣和池清洗。

　　與非水溶劑相容。

　　用戶友好的軟件實(shí)現(xiàn)快速準(zhǔn)確的分析。

　　可升級(jí)至全自動(dòng)的MicroCal Auto-iTC200。