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等溫滴定量熱儀并可測(cè)量溶液中分子間的相互作用

http://m.9999966666.com 檢測(cè)通 時(shí)間:2014-11-25

【摘要】

馬爾文 MicroCal Auto-iTC200 是一款全自動(dòng)低容量高靈敏度的等溫滴定量熱儀。 可在一次實(shí)驗(yàn)中對(duì)所有結(jié)合參數(shù)進(jìn)行直接、無(wú)標(biāo)記的溶液內(nèi)測(cè)量。。 其應(yīng)用包括表征小分子、蛋白質(zhì)、抗體、核酸、脂類和其它生物分子的分子間相互作用。 它也可用于進(jìn)行酶動(dòng)力學(xué)測(cè)量。

方案優(yōu)勢(shì)

----

采用標(biāo)準(zhǔn)

測(cè)量類型:親和力(KD)測(cè)量類型:焓?H測(cè)量類型:熵 ?S測(cè)量類型:化學(xué)計(jì)量(n)Sample capacity:384(四個(gè)96-孔板)Sample tray temperature range:室溫下為4°C ± 2°C樣品量:370μL樣品池容積:200μLInjection syringe volume:40μLInjection volume precision:<1% @ 2μLEquilibration time:< 6 min(從25°C 至 5°C)樣品展示選件:96-孔板Sample capacity:可達(dá) 75/24h(SIM)Cell material:鎳基合金樣品池:硬幣形Noise:0.2 ncal/s溫度范圍:2°C ~ 80°C溫度穩(wěn)定性:± 0.00015°C(25°C時(shí))Response time:10s(高反饋)Multiple feedback modes:是(被動(dòng)、高增益、低增益)電源功率:100-240V, 50/60Hz, 70W重量:91kg尺寸 (寬, 長(zhǎng), 高)::630mm x 350mm x 770mm 運(yùn)行環(huán)境 Operating temperature (°C):10°C ~28°C濕度::0% ~70% 相對(duì)濕度,無(wú)冷凝

方法/原理/步驟

  馬爾文MicroCal Auto-iTC200利用等溫滴定量熱法的技術(shù)來(lái)測(cè)量各種分子相互作用中所涉及到的結(jié)合親和力和熱力學(xué)參數(shù)。

  等溫滴定量熱法(ITC)的原理

  等溫滴定量熱儀測(cè)量?jī)蓚€(gè)分子相互作用時(shí)發(fā)生的熱量變化。當(dāng)相互作用的分子由自由狀態(tài)轉(zhuǎn)入束縛狀態(tài)時(shí)非共價(jià)鍵重新分配和形成,從而導(dǎo)致吸熱或放熱。ITC通過(guò)測(cè)量結(jié)合配偶體被混合時(shí)作用于池加熱器、保持參比池和樣品池零溫差所需的差分電力來(lái)監(jiān)測(cè)這些熱量變化。

  Prod-autoITC200-1

  ITC系統(tǒng)主要部件示意圖。

  參比池通常注入水。樣品池包括一個(gè)結(jié)合配偶體和一個(gè)盛裝配體的攪拌注射器。配體按小等分試樣注入樣品池中,直到配體濃度比樣品濃度高出2至3倍為止。每次注入配體都會(huì)形成一個(gè)熱脈沖與時(shí)間結(jié)合,并進(jìn)行濃度歸一化,以生成kcal/mol對(duì)摩爾比(配體/樣品)的滴定曲線。得出的等溫線配合結(jié)合模型,以生成親和力(KD)、化學(xué)計(jì)量(n)和相互作用的焓(ΔH)。

儀器設(shè)備

  MicroCal Auto-iTC200集MicroCal iTC200的高靈敏度—量熱儀的核心—和唾手可得的自動(dòng)化于一身,以滿足繁忙的研究和藥物發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室的生產(chǎn)力需求。系統(tǒng)直接測(cè)量生物化學(xué)結(jié)合過(guò)程中釋放或吸收的熱量,然后計(jì)算出結(jié)合親和力(KD)、化學(xué)計(jì)量(n)、焓(ΔH)和熵(ΔS)。無(wú)需將樣品和試劑制備到適宜的濃度,分析開(kāi)發(fā)過(guò)程最少,最快得到初步結(jié)果。

  易用的軟件包括優(yōu)化后的自動(dòng)化腳本,各種樣品類型和條件都能夠穩(wěn)健地運(yùn)行。用戶友好的設(shè)計(jì)向?qū)Э蓞f(xié)助選擇實(shí)驗(yàn)運(yùn)行參數(shù)。專業(yè)工具可自動(dòng)處理數(shù)據(jù),實(shí)現(xiàn)快速可靠的分析。

  所有結(jié)合參數(shù)(親和力、化學(xué)計(jì)量、焓和熵)只需一次實(shí)驗(yàn)。

  以最少的分析開(kāi)發(fā)過(guò)程快速獲得初步結(jié)果,無(wú)標(biāo)簽、無(wú)固定化且無(wú)分子量限制。

  出色的數(shù)據(jù)質(zhì)量,可精確到亞毫摩爾到皮摩爾分解常數(shù)(10-2至10-12 M)。

  硬幣形池優(yōu)化了樣品混合。

  非反應(yīng)性鎳基合金具有耐化學(xué)性,與各種生物樣品相容。

  僅用10µg蛋白質(zhì)就可以靈敏地研究任何生物分子的相互作用。

  用戶友好的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)向?qū)Ш妥詣?dòng)數(shù)據(jù)分析功能支持快速可靠的分析。

  樣品呈現(xiàn)在帶溫控的96-孔板上。

  全自動(dòng)系統(tǒng)配備離開(kāi)操作功能,提高了生產(chǎn)率。

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