溶液中大分子穩(wěn)定性測量
http://m.9999966666.com 檢測通 時(shí)間:2014-11-25

【摘要】
MicroCal VP-DSC是一種極其靈敏而易于使用的差示掃描量熱儀,適用于研究溶液中的樣品。 它能直接測量結(jié)構(gòu)化大分子(如蛋白質(zhì)和核酸)的分子內(nèi)穩(wěn)定性,以及復(fù)合體(如寡聚蛋白質(zhì)、核酸雙鏈體和脂類以及洗滌劑膠束系統(tǒng))的分子間穩(wěn)定性。
方案優(yōu)勢
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采用標(biāo)準(zhǔn)
測量類型:溫度中點(diǎn)Tm測量類型:焓?H測量類型:熱容變化?Cp樣品量:700μL樣品池容積:500μLSample capacity:2 -5 個(gè)樣品/ 8小時(shí)(手動(dòng)系統(tǒng))Cell material:鉭樣品池:硬幣形Noise:0.25μCal/°CTypical sample concentration:0.1 - 2.0mg/mL溫度范圍:-10°C ~ 130°CMaximum scan rate:90°C/h 或 120°C/hResponse time:7s(高反饋)Multiple feedback modes:是(被動(dòng)、高增益、低增益)Automated upgrade available:否Baseline repeatability:1.25μCal/°C電源功率:11-240V, 50/60Hz, 70W重量:8.2kg尺寸 (寬, 長, 高)::200mm x 440mm x 190mm 運(yùn)行環(huán)境 Temperature (operating):10°C 到 28°C濕度::0% ~70% 相對濕度,無冷凝
方法/原理/步驟
MicroCal VP-DSC用于研究生物分子的分子內(nèi)穩(wěn)定性。它提供快速準(zhǔn)確的躍遷點(diǎn)(Tm)測定并生成熱力學(xué)信息,以便讓我們能夠深入了解影響構(gòu)象和穩(wěn)定性的因素。
溶液中的生物分子在其自然(折疊)構(gòu)象和變性(去折疊)構(gòu)象之間保持平衡。測得的熱躍遷中點(diǎn)(Tm)可提供快速、簡易的穩(wěn)定性指示。Tm值越大,生物分子越穩(wěn)定。
測量原理
由蛋白質(zhì)和其他大分子形成的清晰結(jié)構(gòu)經(jīng)歷溫度誘導(dǎo)的構(gòu)象變化,如去折疊。這些變化造成非共價(jià)鍵重新分配,從而導(dǎo)致熱吸收。差示掃描量熱儀測量這種熱量的吸收。
Prod-VP-DSC_1
MicroCal VP-Capillary DSC的熱核心包括參比池和樣品池,均封裝在一個(gè)絕緣夾套中。該裝置設(shè)計(jì)成始終保持兩池處于相同溫度。測量過程中,參比池和樣品池同時(shí)以恒定的掃描速率加熱。樣品分子去折疊時(shí),吸收熱量,樣品池和參比池間形成溫差(ΔT)。這就導(dǎo)致整個(gè)帕帖爾單元內(nèi)部形成熱梯度,對兩池進(jìn)行冷卻和加熱,從而形成電壓。電壓被轉(zhuǎn)化為電功率,控制帕帖爾單元將ΔT(溫差)恢復(fù)為0。
例如,由于蛋白質(zhì)去折疊是一個(gè)吸熱事件,在信號中觀察是一個(gè)正位移(熱容)。該“溶解”躍遷的中點(diǎn)為Tm,曲線下的面積就是該過程的焓(ΔH)。
儀器設(shè)備
差示掃描量熱法(DSC)是一種用來表征蛋白質(zhì)和其他分子穩(wěn)定性的強(qiáng)大分析工具。MicroCal VP-DSC提供快速、準(zhǔn)確的躍遷點(diǎn)(Tm)確定功能,可生成樣品的熱力學(xué)信息,讓我們能夠深入了解影響構(gòu)象和穩(wěn)定性的因素。
MicroCal VP-DSC支持無標(biāo)簽研究自然狀態(tài)的分子,可用于彩色溶液或渾濁的懸浮液。它可測量極其嚴(yán)格的結(jié)合常數(shù),最高可達(dá)1020M-1。上樣后無需操作節(jié)省了操作人員的時(shí)間,并且整個(gè)系統(tǒng)不需要其它配件、試劑或耗材。
典型應(yīng)用包括測定蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和去折疊熱力學(xué)特性、抗體域結(jié)構(gòu)測定、膜和脂質(zhì)鑒定和超緊密分子相互作用的測量。
非反應(yīng)性鉭池提供出色的耐化學(xué)性。
池固定在原位,給出可再生和超靈敏的性能,并只需低程度維護(hù)。
有三個(gè)用戶可選的響應(yīng)時(shí)間,實(shí)現(xiàn)最佳性能。
用戶可選的溫度掃描速率和范圍,應(yīng)用多樣性。
自持式增壓系統(tǒng)(0.46 psi),適于研究溫度高于沸點(diǎn)的溶液。
可提供用于測定微分比容的壓力擾動(dòng)量熱附件。
帕帖爾元件保證精確的溫度。
包括MicroCal Thermovac™樣品制備和清洗裝置。
通過VPViewer™軟件控制,通過Origin®進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
Tm飄移配體結(jié)合篩選。
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