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2026年07月29日 星期三
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高效液相色譜法測定飼料中維生素A

http://m.9999966666.com 檢測通 時間:2014-10-31

【摘要】

近期,隨著經濟的復蘇,維生素類飼料添加劑銷售量大大增加,全球原料藥大制造商帝斯曼最近也宣布對飼料維生素A漲價6%,所以飼料中維生素A的檢測就顯得非常緊急和重要。湖南創特參考國標(GB/T 17817-2010),利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀,經實踐檢測可提供飼料中維生素A的HPLC檢測方案,僅供廣大用戶參考。

方案優勢

得出的結果準確可靠,檢出限好,適用于配合飼料、濃縮飼料、復合預混合飼料、維生素預混合飼料中維生素A的測定。

采用標準

參考國標(GB/T 17817-2010)

方法/原理/步驟

  檢測步驟:

  1儀器與試劑

  1.1儀器

  LC-10Tvp高效液相色譜儀

  Vertex色譜柱:150mm×4.6mm×5μm;

  分析天平,感量為分別為0.001g,0.0001g,0.00001g;

  圓底燒瓶,帶回流冷凝器;

  恒溫水浴鍋;

  旋轉蒸發器;

  超純水器。

  1.2試劑

  無水乙醚:不含過氧化物;

  無水乙醇;

  正己烷,色譜純;

  異丙醇,色譜純;

  甲醇,色譜純;

  2,6-二叔丁基對甲酚(BHT);

  無水硫酸鈉;

  氮氣(純度99%);

  碘化鉀溶液;

  淀粉指示液;

  硫代硫酸鈉溶液;

  氫氧化鉀溶液;

  L-抗壞血酸純品;

  酚酞指示劑;

  1,4-二氧六環;

  維生素A乙酸酯標準品:含量≥99%;

  維生素A標準貯備液;

  維生素A標準工作液。

  2試樣溶液的制備

  2.1皂化

  稱取試樣配合飼料或濃縮飼料適量,置入圓底燒瓶中,加L-壞血酸乙醇溶液,使試樣完全分散、浸濕,加氫氧化鉀溶液,混勻,置于水浴上回流,不時震蕩防止試樣粘附在瓶壁上,皂化結束,分別用無水乙醇、水自冷凝管頂端沖洗其內部,取出燒瓶冷卻至40℃。

  2.2提取

  定量轉移全部皂化液于盛有無水乙醚的分液漏斗中,用蒸餾水分2次-3次沖洗圓底燒瓶并入分液漏斗,加蓋、放氣,隨后混合,激烈震蕩,靜置、分層。轉移水相于第二個分液漏斗中,分次用乙醚重復提取兩次,棄去水相,合并三次乙醚相。用蒸餾水多次洗滌乙醚提取液至中性,初次水洗時輕輕旋搖,防止乳化。乙醚提取液通過無水硫酸鈉脫水,轉移到棕色容量瓶中,加BHT使之溶解,用乙醚定容至刻度。以上操作均在避光通風柜內進行。

  2.3濃縮

  從乙醚提取液中分取一定體積置于旋轉蒸發器燒瓶中,在水浴溫度約50℃,部分真空條件下蒸發至干或用氮氣吹干。殘渣用甲醇溶解并稀釋,離心或通過0.45μm過濾膜過濾,用于高效液相色譜儀分析。以上操作均在避光通風柜內進行。

  3色譜條件

  色譜柱:Vertex色譜柱150mm×4.6mm×5μm;

  流動相:甲醇+水=95+5;

  流速:1.0mL/min;

  溫度:室溫;

  進樣量:20μL;

  檢測波長:326nm。

  4維生素A標準高效液相色譜圖

儀器設備

  LC-10Tvp梯度高效液相色譜儀配置

  LC-10Tvp高壓恒流泵:2臺

  SPD-10Tvp紫外檢測器:1臺

  SCL-10Tvp系統控制器:1臺

  7725i手動進樣閥:1套

  色譜工作站:1套(VI2010、N2000、N3000選用)

  液相色譜柱:1支(C18 4.6*250mn,5um)

  微量進樣器:1支(50ul/100ul)

  進樣支架:1只(進樣閥用)

  LC-10Tvp梯度高效液相色譜儀特點

  LC-10Tvp梯度高效液相色譜儀是南京科捷分析儀器有限公司為了快速地滿足多樣化的客戶需求,在原有的STI501液相色譜儀的基礎上經過優化,利用美國先進技術開發設計,國內加工生產的的一款新型的液相色譜儀。LC-10Tvp等度高效液相色譜儀實現了人機對話,可實時對儀器的運行狀態進行監控,并可對潛在和已出現的故障做出判斷,同時提供在線解決方案。該儀器也全面實現了遠程的準無人操作,大大提高了儀器的使用效率,同時通過高精度的AS1000自動進樣系統,實現自動化進樣,最大程度抑制了樣品的交叉污染,提供樣品分析精度。LC-10Tvp等度高效液相色譜儀可廣泛應用于研究開發、醫藥檢驗、食品檢測、化工分析、環境監測等眾多分析領域。

  主要特點

  豐富的功能——符合客戶對分析的不同需求

  硬件具有VP功能,記錄維護信息和操作記錄,符合GLP/GMP要求;系統控制器增具有時鐘、溫度計、濕度計等人性化設計的功能。

  卓越的性能——滿足客戶對儀器的嚴格要求

  檢測器采用進口氘燈、光電池以及1200條/mm凹面光柵組成的雙光束單色器;精密加工的雙透鏡流通池,控制波長調節的高精度微處理器以及雙路高速的采樣頻率,確保了低噪聲、低漂移及超高靈敏度等特點。

  VI2010工作站符合多種法規要求。

  可靠的結果——滿足客戶對結果的準確要求

  與進口儀器做對比試驗,分析結果具有高度的一致性。

  簡便的操作——便于客戶對軟件的熟練操作

  軟件采用多窗口模式,操作方便。

  精美的外觀——滿足客戶對儀器的視覺要求

  外形精美,帶來視覺上的享受。

  技術指標

 

LC-10Tvp高壓恒流輸液泵

輸液方式

微體積串聯雙柱塞

最大輸液壓力

0~9999Psi

流量設定范圍

0.001~9.999ml/min   (以0.001ml/min步長調節流量)

流量設定值誤差

≤0.5%

流量穩定性誤差

≤0.2%RSD

壓力脈動

小于15Psi   (流量1mL/min,壓力600~1600Psi 。)

泵密封性

壓力為5400Psi,時間為10min,壓降小于400Psi 。

時間程序功能

尺寸

W260×H130×D420mm

重量

11kg

使用環境溫度范圍

4~40℃

                  SPD-10Tvp紫外可見可變波長檢測 

波長范圍

190nm~700nm

波長示值誤差

≤±1nm

波長重復性誤差

≤±0.1nm

動態噪聲

≤ ±0.75×10-5AU  (甲醇,1ml/min,254nm,20℃ 。)

靜態噪音

≤ ±0.5×10-5AU  (空池,響應時間1秒,20℃ 。)

動態基線漂移

≤±1×10-4AU/h   (甲醇,1ml/min,254nm,20℃ 。)

靜態基線漂移

≤0.5×10-4  (空池,響應時間1秒,20℃ 。)

線性范圍

≥104

最小檢測濃度

≤1×10-9g/mL  (萘/甲醇溶液)

定性重復性

RSD6≤ 0.1%

定量重復性

RSD6≤ 0.5%

光譜帶寬

6nm

流通池體積

8μL

光程

10mm

時間程序功能

尺寸

W260×H130×D420mm

重量

11kg

使用環境溫度范圍

4~40℃

 

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