方案優(yōu)勢

目前肉食品中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素常用液一質(zhì)聯(lián)用進行全面分析。氯霉素類藥物常用氣相色譜及液相色譜分析。而用高效液相色譜法同時分析肉食品中兩類常見抗生素還未見文獻報道。

采用標準

為了保障人類的生命健康，世界各國衛(wèi)生組織以及食品藥品監(jiān)督管理部門都已經(jīng)將肉食品中各種抗生素殘留量作了嚴格規(guī)定，并且以抗生素在肉食品中的殘留量作為產(chǎn)品進口的貿(mào)易壁壘，如美國和歐盟對阿維菌素在肉食品中的最高殘留限量為25ug/kg，泰勒菌素為100ug/kg，替米考星為100ug/kg，伊維菌素為40ug/kg。

方法/原理/步驟

　　利用高效液相色譜儀(高效液相色譜法)檢測肉類食品中抗生素殘留實驗步驟：

　　1儀器與試劑

　　湖南創(chuàng)特   LC-10Tvp高壓恒流泵

SPD-10Tvp紫外檢測器

　　超聲波清洗儀

　　反相色譜柱C18

　　固相萃取柱

　　泰樂菌素、替米考星、氯霉素、氟苯尼考標準品均為天津市科密歐化學試劑開發(fā)中心監(jiān)制

　　乙腈、正己烷均為優(yōu)級純

　　其它試劑均為分析純

　　實驗用水均為二次蒸餾水

　　新鮮牛肉與雞肉均為超市所購

　　2色譜條件

　　C18反相色譜柱

　　柱溫25℃，流速1mL/min，進樣量25uL，梯度洗脫條件A相為甲醇，B相為0.2mol/L磷酸二氫鈉含10%(體積比)甲醇，調(diào)節(jié)pH為3.0，梯度洗脫程序：0-2min10%A，2-8min 10%-40%A，8-9min40%-10%A，檢測波長入為275nm

　　3標準溶液的配制及標準曲線的制備

　　分別準確稱取各標準品0.01g(精確至0.001g)，用甲醇分別溶解并定容至100mL，配制成100mg/L標準儲備液，于一4℃冰箱中冷藏，測定時將各標準溶液混合后稀釋成0.1、0.2、0.5、1.0、5.0、10.0、15.0、20.0mg/L的溶液。分別以泰樂菌素、替米考星、氯霉素、氟苯尼考峰面積為縱坐標，質(zhì)量濃度為橫坐標繪制標準曲線，計算回歸方程及相關(guān)系數(shù)(r)。

　　4樣品處理

　　將新鮮牛肉及雞肉分別勻漿后，于-18℃冰箱中保存。測定時，將勻漿冷凍保存的牛肉與雞肉樣品于室溫下自然解凍。分別準確稱取20.0g樣品置于50mL具塞錐形瓶中，加入20mL乙腈，超聲10min，轉(zhuǎn)移至離心管，以5000r/min離心10min，收集上清液，離心沉淀物用上述方法重復(fù)提取2次，合并上清液。向得到的清夜中加入30mL正己烷，用力振蕩5min，靜置分層，棄去上層正己烷層。然后將溶液于40℃減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約2mL，氮氣吹干后加入5mL甲醇一磷酸鹽混合液超聲溶解抗生素，最好定容至10mL。

　　5樣品凈化

　　將HLB固相萃取小柱用5mL甲醇、5mL去離子水活化后，將4得到的樣品處理液上固相萃取柱(柱流速保持1滴/s)，用10mL蒸餾水、10mL5%甲醇水溶液淋洗固相萃取柱，再用10mL甲醇洗脫，將洗脫液用氮氣吹干后，加入流動相超聲定容至5mL，最后，經(jīng)0.22um濾膜過濾后進樣。

　　6方法的準確度、精密度、線性范圍、回收率

　　對于牛肉樣品分別添加0.1、0.5、1.0mg/kg 3個水平的混合標準溶液，按照4與5樣品處理及凈化方法，每個水平平行測定4次，進行回收率實驗，并且以3倍信噪比分別計算泰樂菌素、替米考星、氯霉素、氟苯尼考在牛肉樣品中的檢出限，在測定條件下4種藥物在0.1—20mg/L范圍內(nèi)均呈線性，線性方程與相關(guān)系數(shù)、平均回收率、相對標準偏差

　　7實際樣品檢測

　　本實驗分別對10份牛肉樣品和10份雞肉樣品中泰樂菌素、替米考星、氯霉素、氟苯尼考進行檢測，沒有發(fā)現(xiàn)牛肉樣品中含有以上抗生素，但是在4份雞肉樣品中都不同程度檢測到了泰樂菌素，最高為200ug/kg，最低為80ug/kg，平均含量為120ug/kg，高于我國動物性食品中獸藥最高殘留限量標準(100ug/kg)

儀器設(shè)備

　　LC-10Tvp梯度高效液相色譜儀特點

　　LC-10Tvp梯度高效液相色譜儀是南京科捷分析儀器有限公司為了快速地滿足多樣化的客戶需求，在原有的STI501液相色譜儀的基礎(chǔ)上經(jīng)過優(yōu)化，利用美國先進技術(shù)開發(fā)設(shè)計，國內(nèi)加工生產(chǎn)的的一款新型的液相色譜儀。LC-10Tvp等度高效液相色譜儀實現(xiàn)了人機對話，可實時對儀器的運行狀態(tài)進行監(jiān)控，并可對潛在和已出現(xiàn)的故障做出判斷，同時提供在線解決方案。該儀器也全面實現(xiàn)了遠程的準無人操作，大大提高了儀器的使用效率，同時通過高精度的AS1000自動進樣系統(tǒng)，實現(xiàn)自動化進樣，最大程度抑制了樣品的交叉污染，提供樣品分析精度。LC-10Tvp等度高效液相色譜儀可廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗、食品檢測、化工分析、環(huán)境監(jiān)測等眾多分析領(lǐng)域。

　　主要特點

　　豐富的功能——符合客戶對分析的不同需求

　　硬件具有VP功能，記錄維護信息和操作記錄，符合GLP/GMP要求；系統(tǒng)控制器增具有時鐘、溫度計、濕度計等人性化設(shè)計的功能。

　　卓越的性能——滿足客戶對儀器的嚴格要求

　　檢測器采用進口氘燈、光電池以及1200條/mm凹面光柵組成的雙光束單色器；精密加工的雙透鏡流通池，控制波長調(diào)節(jié)的高精度微處理器以及雙路高速的采樣頻率，確保了低噪聲、低漂移及超高靈敏度等特點。

　　VI2010工作站符合多種法規(guī)要求。

　　可靠的結(jié)果——滿足客戶對結(jié)果的準確要求

　　與進口儀器做對比試驗,分析結(jié)果具有高度的一致性。

　　簡便的操作——便于客戶對軟件的熟練操作

　　軟件采用多窗口模式，操作方便。

　　精美的外觀——滿足客戶對儀器的視覺要求

　　外形精美，帶來視覺上的享受。

技術(shù)指標