方案優(yōu)勢

1. 電泳的buffer和gel都是新制的，暗箱式紫外分析儀切膠的臺子清理干凈，刀片最好洗凈滅菌，總之一句話就是保證切下的帶沒有外源dna污染。 2. 切膠是要把整個目的片斷所在位置的膠全部回收。為了減少膠的體積，可以用相對比較薄的膠來做，只要夠點樣即可，也可采用薄而寬的梳子來跑膠。 3. 關(guān)于防護，在一般有機玻璃后就足夠了，戴上防護面具以保護眼睛，如果戴樹脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者對于膠有特殊要求，例如要求不含EB，可以采用點marker和帶刻度的尺子一起照相的方法來確定目的條帶在膠上的位置進行切膠。 4. 按照正常程序點marker跑膠，然后切下有marker的膠，EB染色，紫外燈下與帶刻度的尺子一起照相。由于要回收的帶與marker間的相對位置已知，根據(jù)尺子來衡量未染色膠上目的帶的位置即可。如果覺得很難判斷，可以直接在marker邊點少量的樣，這樣位置就容易確定了。

采用標準

國標

方法/原理/步驟

　　注意開機順序，先開凝膠成像系統(tǒng)，再打開電腦進入軟件。

　　紫外凝膠照相時要防止EB污染儀器，凝膠成像系統(tǒng)的門不能用污染的手套接觸，進行軟件操作時同樣不能被污染的手套接觸。

　　在使用紫外光源照相的過程中，不可以打開凝膠成像系統(tǒng)前面板。

　　照相后經(jīng)廢膠取出，并用較軟的紙擦拭干凈。

　　調(diào)焦時要輕，動作不要劇烈。

　　環(huán)境電壓不穩(wěn)定時，請使用穩(wěn)壓電源。使用過程中如遇斷電，請及時將儀器電源關(guān)閉，直至重新來電。

　　使用時，請先打開儀器的電源開關(guān)，再打開電腦開關(guān)并打開軟件(Quantity One)。

　　保持觀測室內(nèi)環(huán)境干燥，及時將遺留在觀測板上的水或其他液體檫干(可使用軟質(zhì)紙，一般卷紙即可)。

　　觀測用EB(溴乙錠)染色的凝膠時，注意不要污染儀器表面。千萬不要用手光纖冷光源直接接觸凝膠，或戴著接觸過凝膠的手套去接觸儀器的門和觀測臺的把手。

　　使用儀器時，要將門及觀測臺關(guān)緊，否則將無法正常使用紫外燈。

　　盡可能不要將電腦連接到因特網(wǎng)或局域網(wǎng)上，同時在電腦上安裝殺毒軟件(推薦使用正版軟件)，做到專機專用。

　　較長時間不用儀器時，請將儀器用防塵罩蓋上。

　　為延長燈管的使用壽命，請觀測好凝膠后及時關(guān)閉光源(儀器自身有15分鐘的自動保護程序)。

儀器設(shè)備

　　系統(tǒng)配置及主要技術(shù)參數(shù)：

　　▲紫外/白光燈箱：全密閉燈箱，有效保護相機，

　　透射波長：312nm，

　　紫外透射面積：200×200mm，

　　8根燈管，保證強度，照射均勻，紫外光強弱可調(diào)

　　可作瓊脂糖電泳顯微照片，酶標板，放射自顯影照片，Slot/雜交分析等。

　　配有白光轉(zhuǎn)換板，使紫外與白光轉(zhuǎn)換方便快捷。

　　數(shù)碼相機：

　　1010萬象素，分辨率：3072×2304像素；

　　像素密度：8位(256級灰度)；

　　像素大小：4.7×6.1µm；

　　數(shù)碼變焦：約4.1倍；

　　檢測信噪比：≥66 dB；

　　檢測靈敏度：＞1pgEB染色的雙鏈DNA

　　連續(xù)曝光時間：0.0005～900s；

　　微距自動調(diào)焦：5-50mm微距調(diào)焦

　　▲白光板：透射面積250×230mm，可作Protein膠，蛋白電泳

　　▲濾光鏡頭：德國進口琥珀色Eb.專用濾光鏡片，含轉(zhuǎn)換接口

　　▲程控拍攝軟件：全程通過電腦控制數(shù)碼相機的光圈、快門速度、變焦、文件存貯、轉(zhuǎn)換等各項參數(shù)。對數(shù)碼相機的全部操作過程在計算機上實現(xiàn)。

　　▲定量分析軟件：進口分析軟件AABI，可做1D(單向電泳)已漢化、2D(雙向電泳)及RLFP(聚類分析)帶漢化版

　　▲高配置品牌電腦及打印機。

　　YLN-2000凝膠影像分析軟件說明

　　適于：凝膠電泳圖譜、薄層電泳圖譜，圖像格式支持TIF、PCX、BMP和JPG等影像分析圖像獲取方式 能夠輕易地從多種設(shè)備上獲取圖像,如CCD攝像機、數(shù)字化CCD、CooledCCD、掃描儀等全面支持多種文件格式與輸入設(shè)備支持24位彩色,8位、12位、16位精確灰度，32位浮點圖像。

　　灰度光密度校正. 建立背景扣除模式;自動或人工設(shè)定光密度校正功能

　　圖像處理 對待測圖像進行加強效果色彩、亮度、對比度。

　　自動生成用戶程序 用戶可記錄每個操作步驟并生成處理程序,以后只要一次輕擊鼠標即可完成當前工作。

　　泳道分析 自動識別多條泳道和條帶，自動描繪掃描曲線，可修正條帶和前部扭曲等功能。分子量計算 選擇標準的泳道的分子量值，計算出其他泳道的分子量。

　　Dot Blot分析 對圓形，矩形(Slot Blots)Dots,算出每一個dot的密度值并作出統(tǒng)計圖形等功能。

　　Colony計數(shù) 自動/手動找出Spot，多種測量參數(shù)選擇，并可將統(tǒng)計數(shù)據(jù)根據(jù)用戶標準自動分類。

　　面積密度 可自定義計算某一區(qū)域的面積，密度值，平均密度值等參數(shù)。

　　方便交流 所有的分析計算的結(jié)果均可動態(tài)連接到Microsoft Excel電子表格軟件作進一步的分析處理

　　自定義報告格式 系統(tǒng)提供報告生成器，生成專業(yè)公文和研究報告，可以幫助您創(chuàng)作用戶化的圖像報告并交付打印輸出

　　1D主導(dǎo)程序(一維凝膠電泳)

　　預(yù)處理：解析鈍化和增強弱帶

　　1D、PCR、TCL分析簡易參照泳帶

　　試驗泳帶，圖形，用戶自編文件報告和菜單

　　單泳帶或多泳帶定量報告和注釋

　　凝膠上所有泳帶的報告

　　用戶自定義報告定量、辨別、命名及14項功能任意選擇

　　2D(二維)凝膠的定量辨別

　　沿著或圍繞PCR泳帶掃描

　　影像定量：橢圓形、圓形、矩形及隨意形狀定量

　　2D主導(dǎo)程序(二維凝膠電泳)

　　2D：定量和識別(分子量和等電點)，所有或部分

　　2D、PCR、原位雜交、DNA多影像的比較

　　全部或部分斑點的比較和對比表試驗：參比(T/R)及%變化(T-R/R)

　　1D增強程序增補

　　任意兩條泳帶的定量和比較，樣品/參照/比率和每條泳帶T-R/R變化比

　　1D與其它的對比，圖形疊加，識別圖形和對比表

　　多圖形的排列，圖形和列表對比，%均化

　　所有樣品的平均圖形

　　圖形識別：試驗樣品與對照品的圖形識別

　　動態(tài)視覺與定量比較，將一泳帶與旁邊的泳帶疊加并儲存加以分析

　　基因表達和2D動態(tài)對比，疊加全部或部分2D、排列和儲存用于定量對比

　　2D增強程序增補

　　影像圖的圖形比較柱狀圖：紅色(樣品)，綠色(參照物)…兩者相等

　　扣除圖

　　凝膠的規(guī)律性疊加和動態(tài)比較

　　PCR，RFLP

　　基因圖譜，分子量和總量判讀，基因配對，聚類和百分相似比分析

　　PCR和RFLP：總量及分子量判讀

　　單基因或蛋白與其它的百分相似比，基因指紋圖譜，也可聚類分析