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檢測認證人脈交流通訊錄
- 大腸桿菌測試片原理及適用范圍
腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現的食物傳播性疾病的病因。它除引起腹瀉、出血性腸炎外，還可發生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴重的并發癥。自1982年美國首次發現因該致病菌引起的食物中毒以來，腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴散和蔓延，相繼在英國、加拿大、日本等多個國家引起腹瀉爆發和流行。我國已陸續有十余個省份在市售食品、進口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。大腸桿菌O157測試片（BO204）運用微生物測試片專有技術，做成一次性快速檢驗產品，一步培養15～24h就可確認，大大地簡化了檢測程序，非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。
操作方法
樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質杯內，制成1:10的樣品勻液。
接種：將大腸桿菌O157測試片（BO204）置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5min使培養基凝固，最后用手輕輕地壓一下，每個樣品接種兩片。
培養：將測試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養箱內，堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃，培養15～24h。
結果判讀
對測試片進行觀察，呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157:H7；呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本，最好用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
附加說明
1、本品所用培養基已在國外得到比較廣泛的應用，有關驗證試驗表明，接純菌種可以產生典型的紫紅色菌斑，靈敏度達到98%（K.A.Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85：425-428）。
2、本公司檢測大腸桿菌O157測試片對純菌的檢測靈敏度為0.5cfu/mL，3次試驗結果測試片與平皿法的符合率平均達到96.3%。
3、注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理 。
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