檢測認證人脈交流通訊錄
- 紅細胞裂解液 100ml/500ml 60.00/200.00
紅細胞裂解液是一種去除紅細胞最簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細胞,它既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞(僅限于哺乳動物外周血)。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法,主要用于經酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞,可進一步用于原代培養、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。
保存條件:2-8℃保存。
主要成分:NH4Cl,NaHCO3和EDTA。
使用說明
從全血中得到白細胞:
1,紅細胞裂解液冰箱預冷,新鮮抗凝血或者凍存抗凝血,按1:3-5的比例向細胞沉淀中加入紅細胞裂解液混勻。
2,800-1000rpm離心3-5分鐘,離心棄去上層紅色液體。
3,收集沉淀部分,再加入原血等體積的紅細胞裂解液,用去尖吸頭輕輕吹打起來。
4,800-1000rpm離心3-5分鐘,離心棄去上清。
5,如果沉淀還有紅色,可重復步驟2和3。
6,加入Hank’s液或無血清培養液離心洗2-3次。
7,重懸細胞,用于培養實驗。如想提取RNA,最好只裂解一次,立刻進入下一步實驗。而想提取DNA,可以裂解兩三次。直接進入下一步實驗。
組織細胞樣品:
1.新鮮組織經胰酶或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液,離心棄去上清液。
2.從4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向細胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml細胞壓積加入3-5ml裂解液),輕輕吹打混勻。
3.800-1000rpm離心5-8分鐘,離心棄去上層紅色清液。
4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或無血清培養液離心洗2-3次。
5.如裂解不完全可重復步驟2和3。
6.重懸細胞,用于后續實驗。如提取RNA,最好是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液中進行。
注意事項
1.本產品經無菌處理,請在潔凈臺內進行操作。
2.為獲得最佳的裂解效果,加入裂解液混勻后可置冰浴中放置3-5分鐘。
3.裂解的所有步驟都可在冰上或4℃進行。
4.為了您的健康和安全,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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