檢測認證人脈交流通訊錄
食品大腸菌群快速檢驗紙片,食品大腸菌群快速檢測卡,食品大腸菌群快速檢驗試紙
- 1、原理及適用范圍
將乳糖膽鹽選擇性培養基和TTC顯色劑加載在紙片上,經培養后能夠在紙片上生長并發酵乳糖產酸的即為大腸菌群陽性,記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數,根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。 食品大腸菌群檢驗紙片法與國標法中的九管法相對應,將原來幾步的試驗簡化為一步,時間由78h縮短為24h以內,省去了制備培養基、消毒和培養器皿的清洗處理等大量輔助性工作,隨時可以打開包裝進行抽樣檢測。 執行標準:食品安全國家標準 食品微生物檢驗大腸菌群計數MPN計數法(GB/T 4789.3--2010)。
適用于各類食品、飲料等樣品中大腸菌群的快速測定。
2、操作方法
2.1、樣品處理:按無菌操作稱取樣品25g(或25mL)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣瓶或均質杯中,經充分振搖做成1:10的樣品勻液。樣品勻液的pH值應在6.5~7.5之間,必要時用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸調節。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖試管制成1:100的樣品勻液。根據對樣品污染狀況的估計,按上述操作,一次制成10倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次,換一支1mL無菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢,全過程不得超過15min。
2.2、接種
2.2.1、選取兩個稀釋度進行接種,普通食品一般采用1:10和1:100這兩個稀釋度,飲料采用原液和1:10兩個稀釋度。本品每份由三片大紙片(接10mL,袋中二片疊放算作一大片),六片小紙片(接1mL)組成。
2.2.2、用滅菌吸管吸取10mL 1:10樣品勻液加到含有大紙片的塑料袋中(相當于接樣品1g),吸透后平放,做三個重復。再用1mL滅菌吸管吸取1mL同一稀釋度的樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中(相當于接樣品0.1g),做三個重復。再另取一支1mL滅菌吸管吸取1mL 1:100樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中(相當于接樣品0.01g),做三個重復。
2.3、培養:將接種好的紙片(可疊放)放入36℃±1℃培養箱中培養15~24h。
3、大腸菌群最可能數(MPN)的報告
3.1 若紙片變黃或在黃色背景上呈現紅色斑點為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫藍色不變或在紫藍色背景上呈現紅色斑點,但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性紙片。
3.2 記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數,根據《食品飲料大腸菌群MPN表》查出相應的大腸菌群數。
3.3 如接種的第一個梯度為原液,應將表上查出的結果除以10。
4、注意事項
新的國家標準所用的單位改為每克(或毫升)檢樣中大腸菌群最可能數,標準的接種量為0.333g(mL),MPN表也是由此而設計。而使用本品的標準接種量為3.33g(mL),大紙片接種10mL 1:10樣品勻液相當于1g樣品,因而表內數字應相應降低10倍。飲料樣品的接種量為33.3mL,大紙片接種10mL樣品原液,表內數字應降低100倍。
5、保存條件
本產品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質期為一年,鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個月內用完。在高濕度的環境中可能出現冷凝水,最好在拆封前將整包回溫至室溫。
食品、飲料大腸菌群(MPN)檢索表
陽性紙片數 MPN 95%可信限 陽性紙片數 MPN 95%可信限
0.10 0.01 0.001 下限 上限 0.10 0.01 0.001 下限 上限
0
0
0
0 0
0
1
1 0
1
0
1 <3.0
3.0
3.0
6.1 -
0.15
0.15
1.2 9.5
9.6
11
18 2
2
2
2 2
2
2
3 0
1
2
0 21
28
35
29 4.5
8.7
8.7
8.7 42
94
94
94
0
0
1
1 2
3
0
0 0
0
0
1 6.2
9.4
3.6
7.2 1.2
3.6
0.17
1.3 18
38
18
18 2
3
3
3 3
0
0
0 1
0
1
2 36
23
38
64 8.7
4.6
8.7
17 94
94
110
180
1
1
1
1 0
1
1
2 2
0
1
0 11
7.4
11
11 3.6
1.3
3.6
3.6 38
20
38
42 3
3
3
3 1
1
1
1 0
1
2
3 43
75
120
160 9
17
37
40 180
200
420
420
1
1
2
2 2
3
0
0 1
0
0
1 15
16
9.2
14 4.5
4.5
1.4
3.6 42
42
38
42 3
3
3
3 2
2
2
2 0
1
2
3 93
150
210
290 18
37
40
90 420
420
430
1000
2
2
2
2 0
1
1
1 2
0
1
2 20
15
20
27 4.5
3.7
4.5
8.7 42
42
42
94 3
3
3
3 3
3
3
3 0
1
2
3 240
460
1100
<1100 42
90
180
420 1000
2000
4100
-
注1:本表采用3個稀釋度〔0.1g(或0.1ml)、0.01g(或0.01ml)、和0.001g(或0.001ml)〕,每個稀釋度接種3片。
注2:表內所列檢樣量如改用1g(或1ml)、0.1g(或0.1ml)、和0.01g(或0.01ml)時,表內數字應相應降低10倍;如改用0.01g(或0.01ml)、0.001g(或0.001ml)、和0.0001g(或0.0001ml)時,則表內數字應相應增高10倍,其余類推。
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