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上海卓康生物科技有限公司

檢測認證人脈交流通訊錄

代做實驗――細胞轉染服務

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    • 上海卓康以質量為本,樹立“卓康質量”是公司的發展目標。我們一直加倍努力,竭盡全力做到不辜負您的支持與信賴。同時公司也離不開廣大客戶的幫助支持,真誠邀請國內外有實力的實驗室、生物技術公司合作,共同發展。 目前卓康提供的服務范圍包括:生物合成siRNA、shRNA的制備;轉錄編碼shRNA的DNAs、轉錄編碼shRNA的質粒載體訂購;siRNA靶位的設計和實驗選擇分析;siRNA相關試劑和RNA技術相關產品的代理銷售;重組病毒構建包裝;基因蛋白表達、載體構建、多克隆抗體和單克隆抗體制備;多種細胞學服務;常用的分子生物學試劑、實驗儀器、實驗耗材銷售等。 卓康在分子生物學和免疫學實驗技術,特別抗體制備技術方面同樣具有豐富經驗,提供快速、優質、性價比高的實驗服務。 代做實驗――細胞轉染服務 技術簡介: 質脂體轉染 質脂體為人工膜泡,可作為體內,體外物質轉送載體。將需轉移的DNA或RNA包裹于質脂體,由于質脂體具有磷脂雙層與胞膜相似,因此,可與細胞膜融合,將DNA轉入宿主細胞。 影響轉染效率差異的主要原因是細胞系間個體的差異,有的細胞系細胞膜通透性較好,質脂體復合物較容易進入細胞,轉染效率就高。又有的細胞系本生就不容易被轉染。其次脂類與DNA形成易于轉染結構的特性存在負面效應。其中主要的問題是毒性,表現為細胞聚集在一起,從壁上脫落。另為脂質體轉染易于受到血清中的脂肪與脂蛋白以及細胞外基質中帶店成分,如硫酸軟骨素等干擾引起細胞死亡從而影響轉染效率。 電穿孔轉染 核酸不能自動進入細胞,需要協助才能穿過細胞壁的物理屏障進入能夠進行表達和/或復制的胞內位點。電流能夠可逆地擊穿細胞膜形成瞬時的水通路或膜上小孔促使DNA分子進入胞內,這種方法就是電穿孔。電穿孔的主要應用優勢是適用的細胞范圍廣,不論真核細胞還是原核細胞都能被有效轉染。當遇到某些脂質體轉染效率很低和幾乎無法轉入時建議用電穿孔法轉染。 一般情況下,高電場強度會殺死50%-70%的細胞。這種致命的后果根據細胞系的不同而異,與加熱或電解無關,也與當時施加的能量與密度無關。相反,細胞死亡與電場強度與整體作用時間相關。我們公司針對細胞死亡開發出了一種電轉保護劑,大大的降低了細胞的死亡率,同時也提高了電穿孔轉染效率。 腺病毒感染 對于質脂體轉染與電穿孔轉染都無法成功轉染的細胞系建議用腺病毒感染 此法可以快速100%感染率,檢測成功率高。 服務內容: 1. 轉染目的載體確認細胞轉染效率 2. 轉染目的載體后進行相關檢測實驗 客戶須知: 1.一般情況下細胞的轉染效率達到50%,我們才可以成功進行后續檢測實驗。如果在25%-40%,可以進行G418瞬時篩選,低于25%也可以做G418的穩定篩選,大部分情況下我們都會建議用大流式細胞儀進行篩選,此方法既快速又方便,而且可以得到100%的陽性細胞,一般經過大流式篩選的細胞做后續基因水平或蛋白水平檢測都可以得到理想的結果。 2.客戶需提供高效率毒性低的轉染試劑(質脂體)或購買我們公司代理的德國Biontex公司脂質體轉染試劑(此試劑轉染效率中上等優點是毒性低) 3.如客戶提供細胞系轉染效率達到50%,我們可以順利快速進行實驗,約1-2個工作日就可完成此實驗。如客戶提供細胞系轉染效率低于50%,我們就要進行1-2個工作日的 G418的篩選實驗,轉染效率低于25%,無論做G418的穩定篩選還是大流式篩選實驗時間都將推后2-3個工作日。 服務價格: 具體價格根據客戶實驗而定 聯系電話:021-55660344,021-55063976 傳真:021-55063976 網址:www.elisabio.com 網址:www.antibodybio.com 聯系人:黃力,業務qq: 909447355 公司對外郵箱:sales@elisabio.com

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