檢測(cè)認(rèn)證人脈交流通訊錄
篤瑪 牛白介素4(IL-4) ELISA 試劑盒 價(jià)格
- 牛白介素4(IL-4) ELISA 試劑盒
ELISA試劑盒常見問題解析:
1.加樣量不一致?
解決方法:樣品稀釋前應(yīng)充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。
2.樣品數(shù)量多少不一,加樣時(shí)間有長有短?
解決方法:重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與第一次接近。
3.保溫時(shí)間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致?
解決方法:重復(fù)測(cè)定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性。
牛白介素4(IL-4) ELISA 試劑盒
樣品測(cè)定
1. 移取xx微升 去干擾液(Reagent C)到上述待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)樣品管里,混勻
2. 加入xx微升 反應(yīng)液(Reagent D)
3. 加入xx微升 顯色液(Reagent E),混勻
4. 室溫下孵育20分鐘
5. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心3分鐘,速度為5000g
6. 移取1毫升上清液到比色皿
7. 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),獲得待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品讀數(shù)
牛白介素4(IL-4) ELISA 試劑盒
標(biāo)本要求
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20 分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3.尿液:
用無菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5.培養(yǎng)細(xì)胞:
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100 萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6.組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PB(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
上海篤瑪生物科技有限公司
楊燕燕
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