檢測認證人脈交流通訊錄
- 表兒茶素
樣品測定
1. 移取xx微升 去干擾液(Reagent C)到上述待測樣品或標準樣品管里,混勻
2. 加入xx微升 反應液(Reagent D)
3. 加入xx微升 顯色液(Reagent E),混勻
4. 室溫下孵育20分鐘
5. 放進微型臺式離心機離心3分鐘,速度為5000g
6. 移取1毫升上清液到比色皿
7. 即刻放進分光光度儀檢測,獲得待測樣品和標準樣品讀數
表兒茶素
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
48μmol/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
24μmol/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
12μmol/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
6μmol/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
3μmol/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后15 分鐘以內進行。
表兒茶素
性能:
1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2.靈敏度:最低檢測濃度小于10 pg/ml。
3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4.重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
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