檢測認證人脈交流通訊錄
- Hoechst33342染色液
Hoechst 33342也稱bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式為C27H28N6O· 3HCl·3H2O，分子量為615.99，CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低，常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33342也用于普通的細胞核染色、DNA染色。
Hoechst 33342的最大激發波長為346nm，最大射波長為460nm，Hoechst 33342和雙鏈DNA結合后，最大激發波長為352nm， 最大射波長為461nm。Hoechst33342染色液(含封片劑)可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色，無需封片操作。
Hoechst33342染色液
操作步驟(僅供參考)：
(一)固定的組織細胞染色
1、對于細胞或組織樣品，固定后沖洗去除固定劑。如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst 33342染色，如果不需要進行其它染色，則直接進行后續的Hoechst 33342染色。對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst33342染色液(含封片劑)，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品3倍體積以上的Hoechst33342染色液（含封片劑），充分混勻。
2、室溫放置5～8min。
3、輕輕吸除Hoechst33342染色液(含封片劑)。
4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次。
5、無需封片，直接在熒光顯微鏡下觀察。
(二)活細胞染色
1、取96、24、6孔板培養細胞至合適狀態,按96孔板加入100ul、24孔板加入500ul、6孔板加入1ml的比例，加入適當的Hoechst 33342染色液，染液必須充分覆蓋住細胞。
2、在適宜于細胞培養的條件下培養20～30min。
3、輕輕吸取Hoechst 33342染色液（含封片劑）。
4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。
5、無需封片，直接在熒光顯微鏡下觀察。
Hoechst33342染色液
注意事項： Hoechst33342染色液(含封片劑)的濃度適用于各種常規染色的需要。
熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測。
避免反復凍融，否則容易失效。
Hoechst 33342對人體有一定刺激性，請注意適當防護。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
Hoechst33342染色液
染色結果：細胞發生凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
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