檢測(cè)認(rèn)證人脈交流通訊錄
- 名稱: GelRed熒光核酸染色試劑(Unired)
品牌: 美國(guó) Biotium
GelRed是一種靈敏、穩(wěn)定和相對(duì)安全的熒光核酸染色試劑。它可以替代高毒性染色劑-溴化乙錠(EB),用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中dsDNA和ssDNA的染色。GelRed的靈敏度遠(yuǎn)高于EB,并且不需要脫色。由于GelRed和EB有相同的光譜特性,因此用它替代EB時(shí)不需要更換成像系統(tǒng)。
GelRed既可用于預(yù)制凝膠也可用于電泳后染色。通常電泳后染色的靈敏度更高,并能排除染料對(duì)DNA遷移的干擾。使用GelRed進(jìn)行電泳后染色,操作簡(jiǎn)單不需要脫色和特殊溶液。只要將染料稀釋在0.1M NaCl中,并將凝膠置于染色液中,30分鐘后就可以觀察。染色液在室溫下極為穩(wěn)定,可以多次反復(fù)使用。相比而言,預(yù)制凝膠由于不需要額外染色過(guò)程,因此染料用量更少,更為簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)。
除了無(wú)與倫比的靈敏度和穩(wěn)定性外,獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室的毒性測(cè)試也顯示,在凝膠染色的濃度下,GelRed沒(méi)有誘變性和細(xì)胞毒性。GelRed安全性的關(guān)鍵在于它對(duì)于細(xì)胞膜完全沒(méi)有通透性。
常用核酸染色劑選擇依據(jù)
名稱 靈敏度 穩(wěn)定性 適用性 安全性 價(jià)格
Gel red(UniRed) 極高 極高 通用大小片段電泳染色 美國(guó)環(huán)保局安全認(rèn)定 中
Sybr green I 高 較差 100bp以上片段,熒光定量 低毒 高
Sybr Green II 高 較差 單鏈核酸分子 低毒 高
Gold View I 較高 一般 500bp以上雙鏈核酸 高毒性 低
EB 高 極高 100bp以上電泳染色 強(qiáng)致癌 低
產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品描述 產(chǎn)品包裝 產(chǎn)品價(jià)格 庫(kù)存 單位
G05010 GelRed集高靈敏、低毒性和超穩(wěn)定于一身的極佳的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過(guò)美國(guó)環(huán)保局安全認(rèn)定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會(huì)造成任何環(huán)境污染。 500ul ¥720.00 大量 支
吳煩 15011527870 QQ 1170535434
GelRed and Gelgreen 核酸凝膠染料
由美國(guó)BIOTIUM公司技術(shù)專家研發(fā)的GelRed 和GelGreen 是兩種集高靈敏、低毒性和超穩(wěn)定于一身的極佳的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過(guò)美國(guó)環(huán)保局安全認(rèn)定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會(huì)造成任何環(huán)境污染。目前大多數(shù)商業(yè)化的核酸染料(凝膠染色試劑)總是在安全性、穩(wěn)定性和靈敏性等方面不完全令人滿意。例如,雖然 EB (溴化乙啶)作為目前使用最廣泛的核酸凝膠染色試劑,能夠在多數(shù)應(yīng)用中提供可以接受的靈敏度,但它是一種高誘變性的化學(xué)物質(zhì)。而且EB染色后具有較高的背景熒光信號(hào)(如圖1)。 SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被廠家宣傳為最靈敏的凝膠染色試劑。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微堿性電泳緩沖溶液或預(yù)制凝膠中會(huì)快速降解,穩(wěn)定性差導(dǎo)致染色效果極不可靠。 SYBR safe 被認(rèn)為是市場(chǎng)上較為安全的核酸染料 ,但它的染色效果還遠(yuǎn)不及 SYBR Green I 。
至于國(guó)內(nèi)有公司宣稱的新產(chǎn)品Goldview,我們不想多加評(píng)論。因?yàn)閺臉O為相似的對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,該產(chǎn)品似乎就是AO(丫啶橙 ,一種劇毒產(chǎn)品,且熒光亮度不佳)。請(qǐng)看Goldview 與 AO 對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果(其中Goldview是從國(guó)內(nèi)某公司采購(gòu),AO則來(lái)自SIGMA,報(bào)告來(lái)自開放生物)
特性:
高靈敏度
GelRed 和 GelGreen 是目前市場(chǎng)中最靈敏的凝膠核酸染料
穩(wěn)定性極好
可以使用微波爐加熱,可以在室溫下保存
更安全
艾姆斯氏試驗(yàn)結(jié)果表明,該染料的誘變性遠(yuǎn)小于 溴化乙錠 ( EB )
廣泛的適應(yīng)性
適用于預(yù)制凝膠和凝膠電泳后染色
染色過(guò)程簡(jiǎn)單
與 EB 一樣,在預(yù)制膠和電泳過(guò)程中不必?fù)?dān)心染料降解;而電泳后染色過(guò)程也只需 30 分鐘且無(wú)需脫色或沖洗
對(duì) DNA 和 RNA 的遷移影響極小
對(duì)核酸遷移的影響小于 SYBR Green I
與標(biāo)準(zhǔn)凝膠成像系統(tǒng)以及可見(jiàn)光激發(fā)的凝膠觀察裝置完美兼容
使用 312nm 激發(fā)的 UV 凝膠成像系統(tǒng)時(shí), GelRed 可以完美的替代 EB ;使用 254nm 激發(fā)的 UV 凝膠成像系統(tǒng)或可見(jiàn)光激發(fā)的凝膠觀察裝置時(shí), GelGreen 足以替代任意一種 SYBR 染料(見(jiàn)圖 4 中的光譜圖)
Biotium公司的GelRed 和 GelGreen 無(wú)論用于預(yù)制凝膠染色還是凝膠電泳后染色,都表現(xiàn)出了極高的靈敏度。為配合 312 nm UV 凝膠成像系統(tǒng)而設(shè)計(jì)的 GelRed ,在使用了我們新開發(fā)的具有專利的試驗(yàn)步驟后(該試驗(yàn)步驟中使用稀釋的 NaCl 溶液替代傳統(tǒng)的 TBE 緩沖溶液),在凝膠電泳后染色中優(yōu)于或者至少相當(dāng)于 SYBR Gold 。但與 SYBR Gold 不同, GelRed 在預(yù)制凝膠中使用時(shí)仍然有極高的靈敏度,事實(shí)上GelRed 在檢測(cè)低濃度、微量 DNA 方面比 EB 表現(xiàn)出更高的靈敏度,尤其對(duì)小分子量的 DNA 檢測(cè)非常靈敏(圖1)。 GelGreen 可以滿足使用 488 nm 激光凝膠掃描儀或者可見(jiàn)光激發(fā)的 Dark Reader 的研究人員的使用要求。 GelGreen 無(wú)論是在預(yù)制凝膠還是凝膠電泳后染色中都與 SYBR Green I 靈敏度相當(dāng),但不存在后者的不穩(wěn)定性問(wèn)題。實(shí)際上, GelRed 和 GelGreen ,特別是 GelRed 非常穩(wěn)定,可以長(zhǎng)期在室溫下保存。當(dāng)這兩種染料稀釋在 TBE 或者類似的電泳緩沖溶液中時(shí)甚至可以使用微波爐加熱,便于采用常規(guī)方法制備預(yù)制凝膠。含有染料的預(yù)制凝膠可以成批制備,長(zhǎng)期保存。
同樣重要的是, GelRed 和 GelGreen 相比 EB 或 SYBR Green I 提高了安全性。 獨(dú)立的測(cè)試服務(wù)公司( Litron Laboratories, Inc. )進(jìn)行的標(biāo)準(zhǔn)艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果表明, 在 18.5 μ g /mL (該濃度遠(yuǎn)高于推薦用于電泳后染色的 約 4 μ g/mL 的 3X 染色液 )濃度下, GelGreen 沒(méi)有誘變性,而 GelRed 也僅在 S9 代謝活化時(shí)有微弱的誘變性。 GelRed 和 GelGreen 的特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)使其難以穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,正是這一特性降低了染料的細(xì)胞毒性。如圖3。相反, SYBR Green I 廣泛地用于活細(xì)胞線粒體和核 DNA 染色,這正是由于它能快速的被細(xì)胞吞入。由于已知 SYBR Green I 對(duì)紫外線導(dǎo)致的突變有強(qiáng)烈的增強(qiáng)作用( Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001) ),因此它的高細(xì)胞膜透性使它在紫外環(huán)境觀察時(shí)成為凝膠染色的主要有害物質(zhì)。
安全性測(cè)試
SYBR Dyes GelRed GelGreen
A) 5 min. incubation
要想讓DNA染色劑安全,唯一的辦法就是設(shè)法不讓其穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活體細(xì)胞內(nèi),Biotium 做到了!
B) 30 min incubation
圖 3. 在37°C下,分別使用1X SYBR Green I, SYBR Safe, GelRed and GelGreen 對(duì)HeLa 細(xì)胞進(jìn)行孵化,并分別在5分鐘(A)和30分鐘(B)后觀察。實(shí)驗(yàn)顯示SYBR染料迅速進(jìn)入細(xì)胞并將細(xì)胞內(nèi)的核酸染成亮綠色(以上僅圖示 SYBR Green 1),而 GelRed 和 GelGreen 則因?yàn)椴荒艽┩讣?xì)胞膜而完全沒(méi)有進(jìn)入細(xì)胞內(nèi), 足以證明GelRed和GelGreen是安全的。
圖 4. GelGreen (綠色) GelRed (紅色)在 PBS 緩沖溶液中結(jié)合 dsDNA 后的激發(fā)和發(fā)射光譜。
圖 5. 室溫下, GelRed TM ( 500 nm )和 SYBR Gold ( 488 nm )稀釋在 1 × TBE 凝膠染色液中測(cè)得的吸光度隨時(shí)間變化圖。 GelRed 和 SYBR Gold 初始的吸光度值分別為 0.029 和 0.051 。
Table A. 訂貨信息
Cat# Product Name Unit Size Unit Price 促銷價(jià) 品 牌
41001 GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 3X in water 4.0 L ¥1976 ¥ Biotium
41002 GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO 0.5 mL ¥1117 ¥ Biotium
41003 GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water 0.5 mL ¥1176 ¥644 Biotium
41004 GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO 0.5 mL ¥988 ¥ Biotium
41005 GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water 0.5mL ¥1117 ¥580 Biotium
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