檢測認證人脈交流通訊錄
- 豬口蹄疫抗體檢測試劑盒一般采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理。具體步驟是將待檢血清樣品加入已包被有豬口蹄疫病毒抗原的微孔板孔中,若樣品中含有與該抗原結(jié)合的抗體,則抗體與抗原結(jié)合形成復(fù)合物。隨后加入特異性抗豬IgG抗體標記的酶,如辣根過氧化物酶(HRP)等,并在適宜條件下使其與復(fù)合物反應(yīng)形成固定的復(fù)合物。最后加入底物使酶催化反應(yīng)產(chǎn)生顏色,在酶反應(yīng)終止后檢測顏色強度,判斷樣品中是否含有豬口蹄疫抗體。
豬口蹄疫抗體ELISA試劑盒組成:
試劑盒組成48孔配置96孔配置保存
說明書1份1份
封板膜2片2片
密封袋1個1個
酶標包被板1×48 1×96 2-8℃保存
標準品0.3ml×6管0.3ml×6管2-8℃保存
酶標試劑5 ml×1瓶10 ml×1瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
顯色劑A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
顯色劑B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
20×濃縮洗滌液15ml×1瓶25ml×1瓶2-8℃保存
注:標準品濃度依次為:
豬口蹄疫抗體檢測試劑盒的操作步驟一般如下:
1.取出試劑盒并等所有試劑達到室溫(一般為20-25°C),準備好樣本。
2.將標準品、樣品和控制品分別稀釋,加入已經(jīng)涂有豬口蹄疫抗原的微孔板中。
3.在37°C下孵育30分鐘。
4.把孵育后的孔板清洗干凈,并加入稀釋好的辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體。
5.再次在37°C下孵育30分鐘。
6.再次清洗孔板,并添加顯色底物。
7.孔板在避光條件下孵育15分鐘。
8.加入終止液終止反應(yīng)。
9.使用酶標儀進行測定。
注意事項:操作前應(yīng)認真閱讀試劑盒說明書,并嚴格按照說明書要求進行操作。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應(yīng)分別小于10%和15%。
檢測范圍:
靈敏度:
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
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