檢測認證人脈交流通訊錄
- 熒光素標記ESA抗體IgG（標記抗體）樣本的物種應選擇物種相同或有交叉反應的抗體，抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應，因其氨基酸序列同源性較高，如果樣本的種類未列入抗體說明書上的交叉反應種屬表中，并不意味著該抗體不適用于檢測該物種的蛋白，而只是表示該物種尚未用此抗體檢測驗證過，應通過序列比對的方法來預測交叉反應，可應用Expasy和NCBIBLAST來進行不同物種蛋白同源性比對。
熒光素標記ESA抗體IgG（標記抗體）一抗宿主物種的選擇一般說來，在使用偶聯二抗結合無偶聯物的一抗時，一抗宿主動物的物種選擇較為重要，對于免疫組化而言，盡可能選擇與樣本不同種系物種的一抗，從而避免二抗與樣本內源性免疫球蛋白產生交叉反應，例如：檢測小鼠樣本蛋白，則不應選擇小鼠或大鼠源的一抗，選兔源的一抗，則二抗則可選擇偶聯了檢測分子（酶、熒光素、等）的抗兔IgG。如果選擇有偶聯物的一抗則不適用上述情況，除免疫組化外的其它對不含內源性免疫球蛋白樣本的檢測方法，則抗體宿主物種的影響不大，如對不含IgG的細胞裂解物樣本的westernblotting檢測，盡管如此，含有血清的組織裂解物和組織培養上清中含有免疫球蛋白，還原變性樣本中含IgG，在westernblot檢測中則結合出現IgG分子50ａnd25kDa的重鏈和輕鏈條帶。二抗的選擇二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源，例如：如果你的一抗是小鼠的單克隆抗體，二抗則選抗小鼠的二抗anti-mousesecondary。建議檢查二抗說明書確保該抗體適用于你的檢測應用，二抗一般連接熒光素FITC或發光團。
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