檢測認證人脈交流通訊錄
- 植物鈣調素(CAM)elisa試劑盒說明書上海帛科生物相關產品:對傘(對聚傘花素)CAS訂購|咨詢規格:GC≥99%;0.5mL
試劑配制:
1、酶聯板(Assayplate):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(SampleDiluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibodyDiluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液(HRP-avidinDiluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMBSubstrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(WashBuffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(StopSolution):1×10ml/瓶(2NH2SO4)。
測定步驟:
1.加樣
1.除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或抗體結合的物質以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質量和軟件的算法。
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