檢測認(rèn)證人脈交流通訊錄
食品肉毒桿菌檢測 奶粉肉毒桿菌檢測 肉毒桿菌檢測機(jī)構(gòu)
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對應(yīng)法規(guī):國內(nèi)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)
CNAS認(rèn)可項目:是
- 肉毒桿菌是一種生長在缺氧環(huán)境下的致病菌,在罐頭食品及密封腌漬食物中具有極強(qiáng)的生存能力,它在繁殖過程中所分泌的肉毒毒素具有極強(qiáng)的毒性,是KCN毒性的一萬倍。純化結(jié)晶的肉毒毒素1mg能殺死2億只小鼠,對人的致死劑量約0.1μg。它通過阻斷人體神經(jīng)接頭,導(dǎo)致全身麻痹、癱瘓,嚴(yán)重時能引起人呼吸肌麻痹,導(dǎo)致無法呼吸,最終死亡。
目前報道新西蘭恒天然奶粉大批量被肉毒梭菌污染,給人們身心健康造成了極大的危害,國家加大了對食品質(zhì)量安全的排查力度,為此,科標(biāo)生物檢測中心現(xiàn)全面開展食品中肉毒梭菌檢測服務(wù),為食品安全檢測貢獻(xiàn)一份力量。
科標(biāo)生物檢測中心主要結(jié)合GB/T4789.12-2003食品中衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 肉毒梭菌及內(nèi)毒素檢驗和SN/T 2525-2010食品中肉毒梭菌的PCR檢測方法對食品中肉毒桿菌進(jìn)行檢驗。
將樣品經(jīng)增菌后劃平板分離單菌落,挑取可疑菌落到胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯(TPGY)培養(yǎng)基培養(yǎng),對培養(yǎng)物用DNA提取試劑盒抽提DNA,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,用瓊脂糖凝膠電泳檢驗PCR產(chǎn)物中是否含有肉毒梭菌的的特征條帶,從而對食品中是否污染肉毒梭菌進(jìn)行快速檢測。
試驗方法
1、樣品的增菌培養(yǎng)
取庖肉培養(yǎng)基2管和TPGY培養(yǎng)基2管,煮沸10min~15min(為了排除溶解于培養(yǎng)基中的氧,切勿搖動),迅速冷卻。每15ml培養(yǎng)基中接種1g~2g固體食品或1ml~2ml液體食品(緩慢地將接種物接入肉湯液面下)。將樣品接種2管庖肉培養(yǎng)基(35±1℃下培養(yǎng))和2管TPGY培養(yǎng)基(28±1℃下培養(yǎng)),均厭氧培養(yǎng)5天。觀察培養(yǎng)物的濁度、產(chǎn)氣、肉粒的消化和產(chǎn)生的氣味。若有生長繼續(xù)以下操作,若無生長,則繼續(xù)培養(yǎng)10天。
2、培養(yǎng)物分離
取2ml培養(yǎng)液置于無菌試管中,加入等量無菌無水乙醇,混勻,放置1h。用接種環(huán)取2環(huán)經(jīng)處理過的培養(yǎng)物接種到厭氧卵黃瓊脂上,35±1℃下厭氧培養(yǎng)48h。挑取可疑菌落接種到TPGY培養(yǎng)基,35±1℃下厭氧培養(yǎng)24h。
3、DNA提取、擴(kuò)增
取1.4mlTPGY培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到離心管中,13000r/min離心2min,棄去上清液。沉淀加入500μl生理鹽水,震蕩重懸30s,13000r/min離心2min,棄去上清液。沉淀中直接加入50μlDNA提取液充分混勻,沸水浴10min,13000r/min離心3min,取上清液4μl進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增的DNA跑瓊脂糖凝膠電泳,電泳結(jié)果用凝膠成像系統(tǒng)記錄。
結(jié)果判定
陰性對照和空白對照均未出現(xiàn)條帶,陽性對照出現(xiàn)預(yù)期大小的擴(kuò)增條帶,待測樣品出現(xiàn)預(yù)期大小的擴(kuò)增條帶則判定為PCR結(jié)果陽性,科標(biāo)生物檢測中心報告“檢出某型(A,B,E,F)肉毒梭菌”。待測樣品未出現(xiàn)預(yù)期大小的擴(kuò)增條帶則判定為PCR結(jié)果為陰性,科標(biāo)生物檢測中心報告“未檢出某型(A,B,E,F)肉毒梭菌”。
檢測咨詢熱線:0532-58979362 24小時應(yīng)急熱線:18906422741 聯(lián)系人:李工
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科標(biāo)生物檢測
- 地址:
- 青島市北區(qū)四流南路94號科標(biāo)大廈
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